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実施例 KOD FX Neo 実施例7 コンポスト(堆肥)を用いたメタゲノム解析 コンポスト(堆肥)から、さまざまな方法を用いて粗抽出したDNA溶液(処理上清)をサンプルとして、原核生物共通プライマーを用いてrDNAの増幅を行いました。その結果、アルカリ溶解法とワンステップ法で調製したサンプルを用いた検討において、一般的に広く行われているCTAB法と同程度の増幅を確認することができました(右図)。 ...
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実施例 KOD FX Neo 実施例8 マウス爪を用いたダイレクトPCR 微量かつクルードなサンプルの実施例としてマウスの爪からの直接PCRを実施しました。 マウスのジェノタイピングでは通常、血液や尾を使用しますが、マウスを傷つけてしまうという欠点がありました。爪を用いることでマウスを傷つけることなくジェノタイピングが可能になります。その方法を紹介いたします。 【サンプル】マウス爪 ●採取方法 マ ...
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実施例 KOD FX Neo 実施例9 ES細胞での遺伝子組換え判定 【データご提供】 群馬大学先端科学研究指導者育成ユニット 山本正道 先生 【サンプル】ES細胞のゲノムDNA 【サンプルの処理】 ES細胞をProKにて溶解した後、フェノール/クロロフォルム→クロロフォルム→イソプロパノール沈殿を行った後にTE溶液にて溶解した。 【遺伝子名】ROSA26領域に特定のcDNAを ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例7 ゲノムDNA相対定量 【データご提供】 日本大学 薬学部 ゲノム創薬学研究室 小林 秀昭 先生 【結果】 1. 融解曲線 (鋳型DNA 5ng) KOD SYBR™ qPCR Mixでは融解曲線は1つのピークであったが、A社リアルタイムPCR試薬では複数のピークが認められた。 2. 増幅曲線 KOD SYBR™ qPC ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例8 クルードサンプル(菌液)を用いたリアルタイムPCR 【データご提供】日本大学 薬学部 ゲノム創薬学研究室 小林 秀昭 先生 【実験結果】 1. 精製DNAと菌液の増幅曲線 赤:精製DNA 緑:菌液 菌液の増幅曲線の傾きは、精製DNAのものとほぼ一致した。 2. 精製DNAと菌液の融解曲線 赤:精製DNA 緑:菌液 菌液の融解曲線のパタ ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例9 生物農薬糸状菌の特異的検出及び定量 【データご提供】 神戸大学大学院 農学研究科 生命機能化学専攻 細胞機能構造学研究室 池田 健一 先生 ・ 宿南 良 様 【実験結果】 1. A社qPCRキットでの結果 a. 増幅曲線 b. 融解曲線 2. KOD SYBR™ qPCR Mixでの結果 a. 増幅曲線 b. 融解曲線 水色: 5 ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例10 ChIPターゲットの効果的な増幅 先生方からいただきました実施例を掲載いたしております。実験にお役立てください。 【結果】 各qPCR Mixの増幅曲線の比較 A社qPCRキット KOD SYBR™ qPCR Mix 【サンプル】 ヒトゲノムDNA 【サンプルの調製方法】QIAGEN社のQIAamp® DNA Mini Kitキ ...
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実施例 KOD FX 実施例1 アルカリ溶解法で調製したマウステールライセートからの増幅 アルカリ溶解法(右の基本反応条件ご参照)で調製したマウステールライセート0.5μLを直接PCR反応液に添加して、Mouse membrane glycoprotein(Thy-1)gene(M10246)をターゲットとして、2ステップサイクルを用いて、30サイクルの増幅を行いました。 その結果、KOD ...
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実施例 KOD FX 実施例5 Template別増幅可能長 KOD FXでは、λDNAを鋳型に40kb、ヒトゲノムDNAを鋳型に24kb、cDNAを鋳型に13.5kbの増幅が可能です。 KOD FX 製品ページ 実施例一覧ページ
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実施例 KOD FX 実施例6 真核細胞最長DMD遺伝子(13.5Kb)のPCRクローニング ヒトジストロフィン(DMD)遺伝子は、真核細胞における最も長いmRNAの一つです。ここでは、KOD FXを用いて本遺伝子の全長クローニングを行った例をご紹介します。 【実験方法】 逆転写反応 1st Strand 合成キット:ReverTra Ace -α-® [ Code No. FSK-1 ...
