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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例7 ゲノムDNA相対定量 【データご提供】 日本大学 薬学部 ゲノム創薬学研究室 小林 秀昭 先生 【結果】 1. 融解曲線 (鋳型DNA 5ng) KOD SYBR™ qPCR Mixでは融解曲線は1つのピークであったが、A社リアルタイムPCR試薬では複数のピークが認められた。 2. 増幅曲線 KOD SYBR™ qPC ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例8 クルードサンプル(菌液)を用いたリアルタイムPCR 【データご提供】日本大学 薬学部 ゲノム創薬学研究室 小林 秀昭 先生 【実験結果】 1. 精製DNAと菌液の増幅曲線 赤:精製DNA 緑:菌液 菌液の増幅曲線の傾きは、精製DNAのものとほぼ一致した。 2. 精製DNAと菌液の融解曲線 赤:精製DNA 緑:菌液 菌液の融解曲線のパタ ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例9 生物農薬糸状菌の特異的検出及び定量 【データご提供】 神戸大学大学院 農学研究科 生命機能化学専攻 細胞機能構造学研究室 池田 健一 先生 ・ 宿南 良 様 【実験結果】 1. A社qPCRキットでの結果 a. 増幅曲線 b. 融解曲線 2. KOD SYBR™ qPCR Mixでの結果 a. 増幅曲線 b. 融解曲線 水色: 5 ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例10 ChIPターゲットの効果的な増幅 先生方からいただきました実施例を掲載いたしております。実験にお役立てください。 【結果】 各qPCR Mixの増幅曲線の比較 A社qPCRキット KOD SYBR™ qPCR Mix 【サンプル】 ヒトゲノムDNA 【サンプルの調製方法】QIAGEN社のQIAamp® DNA Mini Kitキ ...
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実施例 KOD FX 実施例1 アルカリ溶解法で調製したマウステールライセートからの増幅 アルカリ溶解法(右の基本反応条件ご参照)で調製したマウステールライセート0.5μLを直接PCR反応液に添加して、Mouse membrane glycoprotein(Thy-1)gene(M10246)をターゲットとして、2ステップサイクルを用いて、30サイクルの増幅を行いました。 その結果、KOD ...
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実施例 KOD FX 実施例5 Template別増幅可能長 KOD FXでは、λDNAを鋳型に40kb、ヒトゲノムDNAを鋳型に24kb、cDNAを鋳型に13.5kbの増幅が可能です。 KOD FX 製品ページ 実施例一覧ページ
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実施例 KOD FX 実施例6 真核細胞最長DMD遺伝子(13.5Kb)のPCRクローニング ヒトジストロフィン(DMD)遺伝子は、真核細胞における最も長いmRNAの一つです。ここでは、KOD FXを用いて本遺伝子の全長クローニングを行った例をご紹介します。 【実験方法】 逆転写反応 1st Strand 合成キット:ReverTra Ace -α-® [ Code No. FSK-1 ...
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実施例 KOD FX 実施例7 プライマー設計に制限がある場合の増幅 配列情報が少なく、オープンリーディングフレーム(ORF)の末端にしかプライマーを設計できないような時など必ずしも最良なプライマーペアを設計できるとは限りません。以下に、通常のプライマーの設計が困難なターゲットの例として、MAPK1遺伝子(下記参照)のORFの増幅を行った結果を示します。 なお、他社製品のPCR条件は各社で推奨され ...
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実施例 KOD FX 実施例9 血液(Whole Blood)サンプルからの増幅 KOD FXは、血液(Whole Blood)サンプルからの直接増幅が可能です。 1. 他社製品との比較(写真上) 【サンプル】血液 1～4μL / 50 μL Reaction 【遺伝子名】Human β-globin gene 【ターゲット長】1.3kb 2. 伸長性の確認(写真下) 【サン ...
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実施例 KOD FX 実施例10 培養細胞懸濁液からの増幅 KOD FXと他社製品を用いて、細胞懸濁液からの直接増幅を試みました。 【サンプル】DMEM/10%血清培地を用いて培養したJurkat細胞 【ターゲット長】1.3, 3.6, 8.5 kb 【プライマー配列】 Primer 1.3 kb β-globin Target Primer F : 5’-TTAGGCCTT ...
