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実施例 KOD FX 実施例21 ヒトSF-1cDNA(GCリッチ)の増幅 【遺伝子名】ヒトSF-1 【サンプル】ヒト精巣cDNA 1ng 【ターゲット長】約1.4kbp 【プライマー条件】23mer、0.25μm 【サイクル】 KOD FX: 94℃ 2min. (98℃ 10sec., 68℃ 1min.30sec.) × 30cycle 他社酵素:推奨条件 ...
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実施例 KOD FX 実施例22 コロニーPCRによる酵母形質転換体の確認 ≪Zymolyase処理あり≫ 【遺伝子名】 Xanthophyllomyces dendrorousからクローニングし、Saccharomyces cerevisiae Y187にプラスミドの状態で導入した配列4種(A-D) 【サンプル】 上記配列を導入したS. cerevisiae Y187のコロニーをつまようじで少量 ...
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実施例 KOD FX 実施例23 新規イネOsSRS3遺伝子の5´領域の単離 【遺伝子名】イネOsSRS3(5’ 領域のGC含量は、約80%) 【サンプル】イネ花芽由来のcDNA 【ターゲット長】2.4kb 【プライマー条件】 Forward 20mer 5’-TCCCGGCCTGACCTCTCTAC-3’ Reverse 20mer 5’-CAAA ...
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実施例 KOD FX 実施例24 ヒト糞便から精製したDNAを用いた Helicobacter pylori cagA遺伝子の増幅 【遺伝子名】 Helicobacter pylori cagA 【サンプル】 ヒトの糞便からQIAmp DNA stool mini kit (QIAGEN)を用い精製したDNA 【ターゲット長】 239bp 【プライマー条件】 1st PCR Forward:AAC ...
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実施例 KOD FX 実施例25 トランスジェニックラット血液(ろ紙血)からのGFP遺伝子の検出 【遺伝子名】 eGFP gene 【サンプル】 Wistarラット 3週令 血液* 【サンプル採取方法】 ろ紙はWhatman社 filter papter1または2( Φ 90mm)使用 【ターゲット長】 171 bp 【プライマー条件*】 Forward: 5'-CACCATCTT ...
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実施例 KOD FX 実施例26 DGGE法を用いた沿岸海域に生息する植物プランクトン(クリプト藻)の多様性の解析 【遺伝子名】PsbA(光化学系II反応中心のD1タンパク ) 特にクリプト藻をターゲットとした 【サンプル】海水の(デュラポア)フィルターろ過サンプル 【サンプル調製方法】 ろ過したフィルターに溶解液*1mLを加え、55℃で1時間処理 →フィルターを除去し、遠心(10, ...
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実施例 KOD FX 実施例27 緑膿菌DNAの遺伝子増幅 【サンプル】緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa K767)の染色体DNA* 【遺伝子名】PA5471 【ターゲット長】約1.5 kb 【プライマー配列*】 Primer F:5’-GCTAGAATTCGATCTACCGTTTCAATCACATGGAT-3’ Primer R:5’-GA ...
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実施例 KOD FX 実施例28 マウス尾溶解液からのゲノムDNAの増幅 ≪実験1. マウス尾溶解液を用いたPCR効率比較≫ ≪実験2. プラスミドサンプルを用いたPCR効率比較≫ 【サンプル】 実験 1) mouse tail lysed with Proteinase K 0.5 μL 実験 2) Plasmid (20 ng) 【ターゲット】ターゲット遺伝子名、増幅サイズ 実験 1) ...
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実施例 KOD FX 実施例29 病原酵母Cryptococcus neoformans菌体(コロニー)からのダイレクトPCR 【サンプル】 病原酵母Cryptococcus neoformans菌体(コロニー) 【前処理】 なし(コロニーを直接使用) 【ターゲット】 任意の酵素遺伝子 1.8 kb 【プライマー】 20塩基(配列非公開) 【反応液組成】 KOD FX : バッファー 25 &mu ...
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実施例 KOD FX 実施例30 カビ(Aspergillus oryzae)からのダイレクトPCR KOD FX は、酵母やカビのコロニーPCRを行うことが可能です。 【サンプル】 カビ菌体(懸濁液) 【前処理】 懸濁(菌体を直接使用) <ピペットでカビをかきとり、TEバッファー50 μLに懸濁する> 【ターゲット】 Aspergillus oryzae amy gene fo ...
