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実施例 Quick Taq 実施例4 増幅産物を用いた直接制限酵素処理 Quick TaqⓇ HS DyeMixによって増幅したPCR産物(β-globin遺伝子3.6kb)を用いて、数種類の制限酵素で処理を行い、増幅産物を直接制限酵素で切断できるか確認しました。 【方法】 1.Human Genomic DNA 50ngを鋳型としてPCRを行いました。 2.増幅産物を10μL使用 ...
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実施例 Can Get Signal immunostain 実施例8 皮膚モデルにおけるPCNA(増殖細胞核抗原)の検出(免疫染色) ヒト皮膚組織モデルTESTSKINTMから調製したパラフィン包埋切片を用い、1次抗体として抗PCNAマウスモノクローナル抗体、2次抗体にビオチン標識抗マウスIgG抗体をそれぞれ用いて、免疫組織化学染色PCNAの検出を行いました(ABC法)。抗体の反応には、Can ...
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実施例 KOD FX 実施例2 ワンステップ法で調製した植物ライセートからの増幅 ワンステップ法で調製したトマト、タバコ、イネの葉、及び精米のライセート1μlを直接PCR反応液に添加して、rbcLをターゲットとして、2ステップサイクルを用いて、30サイクルの増幅を行いました。その結果、KOD FXを用いたときのみ明瞭な増幅が認められました。 また、タバコ葉で2.2, 4.6kbをターゲットに ...
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実施例 KOD FX 実施例15 Chick GAD67プロモーター領域のクローン化 【遺伝子名】Chick GAD67プロモーター領域 【サンプル】:Chick kidney genomic DNA 0.1μg 【ターゲット長】:6,273bp 【プライマー条件】 F primer:TCAGGTTGGTGTTCTCTCACTG 22mer R primer:TCAGCGCGGGTTGAAA ...
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実施例 KOD FX 実施例17 c-mos遺伝子の増幅(変異導入のためのPCR) 【遺伝子名】プロトオンコジーンc-mos 【サンプル】Plasmid DNA 5ng 【ターゲット長】約4.5kb 【プライマー条件】32mer、0.2μM (final) 【サイクル】 KOD FX: 95℃,3min.- (95℃,30sec.-55℃,1min.-72℃,4min.)×20c ...
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実施例 KOD FX 実施例16 BMP-2遺伝子の増幅 【遺伝子名】Mouse BMP-2 【サンプル】Mouse genome BAC clone DNA 0.1μg 【ターゲット長】約2kb(GC-rich領域含む) 【プライマー条件】20mer、1μM(final) 【サイクル】 KOD FX: (98℃,10sec.-68℃,2min.)×35cycles A社L ...
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実施例 KOD FX 実施例18 Human転写因子(HNF3b, C/EBPβ, FTFおよび HNF6)cDNAとmiR-17,18,19,20,92領域genomic DNAの増幅 【遺伝子名、ターゲット長、及びプライマー配列】 ●HNF3b (ターゲット長:1.4kb) プライマー 5'ACTCGAATTCCAGTATGCTGGGAGCGGTGAAGA3’ ...
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実施例 KOD FX 実施例19 植物発現プロモーターに連結させた植物ウイルスcDNA増幅 【遺伝子名】発現プロモーター+植物ウイルスcDNA 【サンプル】プラスミドDNA 0.2μg 【ターゲット長】11kb 【プライマー条件】21 mer(GC=21%) 【サイクル】 KOD FX: 94℃, 2.5min., (94℃, 15sec., 57℃, 15sec., 68℃, 7min. ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例4 ASP(Allele specific primer)-PCRを用いるSNP(Single nucleotide polymorphism)解析 一方のプライマーの5’末端にGC tailを付加することにより、同サイズのターゲットの識別を融解曲線解析により行うことができます。さまざまな原理のASP-PCRに応用可能です。以下では、 ...
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実施例 KOD SYBR™ qPCR Mix 実施例5 植物葉からの検出 (A) 短鎖Target ワンステップ法にて作製したイネライセート及び精製DNAを用いて、弊社従来品と本製品の比較を行いました。その結果、本製品ではライセートを用いて特異的な増幅が認められましたが、Taq DNA polymeraseを使用している従来品では増幅が認められませんでした。 (B) 長鎖Target 増幅長が1. ...
