実施例

KOD FX 実施例37 ヒト爪からの直接PCR

【サンプル】ヒトの爪(米粒の1/3程度の大きさ)



【遺伝子名・ターゲット長】

Human  β-globin　1.3～8.5 kb

【プライマー】
1.3 kb β-globin
Forward primer:　5’-TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC-3’
Reverse primer:　5’-CCAGGATTTTTGATGGGACACG-3’
2.8 kb β -globin
Forward primer: 　5’-GCTGCTCTGTGCATCCGAGTGG-3’
Reverse primer: 　5’-CCAGGATTTTTGATGGGACACG-3’
3.6 kb β -globin
Forward primer:　5’-GGTGTTCCCTTGATGTAGCACA-3’
Reverse primer:　5’-ACATGTATTTGCATGGAAAACAACTC-3’
8.5 kb β -globin
Forward primer:　5’-TGATAGGCACTGACTCTCTGTCCCTTGGGCTGTTT-3’
Reverse primer:　5’-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3’

【反応液組成】

【PCRサイクル条件】
94℃, 2 min.
↓
(98℃ 10sec.,   68℃  1min./kb) × 35 cycles


【コメント】

KOD FXは、血液などから直接PCRが可能であることが分かっていましたが、今回、爪を直接サンプルとして用いても、8.5 kbまでの増幅を認めることができました。本方法を用いることによって、より簡便にジェノタイピングなどが可能になると思われます。

KOD FX 製品ページ
実施例一覧ページ