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実施例 KOD FX 実施例37 ヒト爪からの直接PCR 【サンプル】ヒトの爪(米粒の1/3程度の大きさ) 【遺伝子名・ターゲット長】 Human β-globin 1.3～8.5 kb 【プライマー】 1.3 kb β-globin Forward primer: 5’-TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC-3’ Reverse primer: ...
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実施例 KOD FX 実施例38 タバコ葉からの直接PCR 【サンプル】 タバコの葉(2mm角) 【遺伝子名・ターゲット】 rbcL, rbcmtT 1.3～4.6 kb 【プライマー】 1.3 kb rbcL Forward primer: 5’-ATGTCACCACAAACAGAGACTAAAGC-3’ Reverse primer: 5’-AAGCAGCA ...
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実施例 KOD FX 実施例39 植物葉からの迅速DNA増幅 【背景】 実施例集に記載されていた95℃10分間の加熱による方法では,目的とするDNAの増幅が見られなかった。そこで、葉をペッスルを用いて破砕する方法を用い、少量多サンプルからのDNA簡易抽出と高効率PCRを実験の目的とした。 【サンプル】 イネおよびタケ類の葉 【サンプルの処理】 抽出液は実施例集に記載されていた Buffer A と ...
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実施例 KOD FX 実施例40 メダカ幼魚の遺伝子による性別判断方法 【サンプル】ヒメダカ (Oryzias latipes) の成魚のオス、メスおよび幼魚(性別不明) 【サンプルの処理】 (1) ヒメダカを氷の入ったシャーレに入れて1-2分間放置する。 (2) ヒメダカ尾鰭約50mgをはさみとピンセットを用いて切り取り、生体試料破壊器具(BioMasher; 株式会社ニッピ)の中に入れる。 ( ...
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実施例 Quick Taq 実施例4 増幅産物を用いた直接制限酵素処理 Quick TaqⓇ HS DyeMixによって増幅したPCR産物(β-globin遺伝子3.6kb)を用いて、数種類の制限酵素で処理を行い、増幅産物を直接制限酵素で切断できるか確認しました。 【方法】 1.Human Genomic DNA 50ngを鋳型としてPCRを行いました。 2.増幅産物を10μL使用 ...
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実施例 Can Get Signal immunostain 実施例8 皮膚モデルにおけるPCNA(増殖細胞核抗原)の検出(免疫染色) ヒト皮膚組織モデルTESTSKINTMから調製したパラフィン包埋切片を用い、1次抗体として抗PCNAマウスモノクローナル抗体、2次抗体にビオチン標識抗マウスIgG抗体をそれぞれ用いて、免疫組織化学染色PCNAの検出を行いました(ABC法)。抗体の反応には、Can ...
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実施例 KOD FX 実施例2 ワンステップ法で調製した植物ライセートからの増幅 ワンステップ法で調製したトマト、タバコ、イネの葉、及び精米のライセート1μlを直接PCR反応液に添加して、rbcLをターゲットとして、2ステップサイクルを用いて、30サイクルの増幅を行いました。その結果、KOD FXを用いたときのみ明瞭な増幅が認められました。 また、タバコ葉で2.2, 4.6kbをターゲットに ...
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実施例 KOD FX 実施例15 Chick GAD67プロモーター領域のクローン化 【遺伝子名】Chick GAD67プロモーター領域 【サンプル】:Chick kidney genomic DNA 0.1μg 【ターゲット長】:6,273bp 【プライマー条件】 F primer:TCAGGTTGGTGTTCTCTCACTG 22mer R primer:TCAGCGCGGGTTGAAA ...
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実施例 KOD FX 実施例17 c-mos遺伝子の増幅(変異導入のためのPCR) 【遺伝子名】プロトオンコジーンc-mos 【サンプル】Plasmid DNA 5ng 【ターゲット長】約4.5kb 【プライマー条件】32mer、0.2μM (final) 【サイクル】 KOD FX: 95℃,3min.- (95℃,30sec.-55℃,1min.-72℃,4min.)×20c ...
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実施例 KOD FX 実施例16 BMP-2遺伝子の増幅 【遺伝子名】Mouse BMP-2 【サンプル】Mouse genome BAC clone DNA 0.1μg 【ターゲット長】約2kb(GC-rich領域含む) 【プライマー条件】20mer、1μM(final) 【サイクル】 KOD FX: (98℃,10sec.-68℃,2min.)×35cycles A社L ...
