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実施例 KOD FX 実施例13 ヒト毛根サンプルからの簡便なPCR増幅 【サンプル調製】 毛根は、ヒト毛髪の根元から約2mm程度のところで切断し、毛根を含む部分をサンプルとしました。これを5本使用し、図1に示すアルカリ溶解法にてライセートを調製しました。なお、本方法では、毛根は完全に溶解しませんのでご注意ください(完全に溶解させる必要はありません)。また、溶解液の核酸濃度は測定できませんでした。 ...
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実施例 KOD FX 実施例14 マウスゲノムDNAを用いたPGK neo遺伝子の検出 【遺伝子名】PGK neo 【サンプル】Mouse genomic DNA 5～10ng 【ターゲット長】1.5kb 【プライマー条件】30mer, 0.4μM (final) 【サイクル】 KOD FX: 94℃ 2min , (98℃ 10sec., 68℃ 90sec.)×30 A社 ...
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実施例 KOD FX 実施例20 ヒトCYP11A1遺伝子のプロモーター領域の増幅 【遺伝子名】ヒトCYP11A1遺伝子5'上流領域 【サンプル】ヒト間葉系幹細胞株UE7T-13ゲノム 1ng 【ターゲット長】2350bp 【プライマー条件】27mer、0.25μm 【サイクル】 KOD FX: 94℃ 2min. (98℃ 10sec., 68℃ 2min.30sec.) &tim ...
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実施例 KOD FX 実施例21 ヒトSF-1cDNA(GCリッチ)の増幅 【遺伝子名】ヒトSF-1 【サンプル】ヒト精巣cDNA 1ng 【ターゲット長】約1.4kbp 【プライマー条件】23mer、0.25μm 【サイクル】 KOD FX: 94℃ 2min. (98℃ 10sec., 68℃ 1min.30sec.) × 30cycle 他社酵素:推奨条件 ...
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実施例 KOD FX 実施例22 コロニーPCRによる酵母形質転換体の確認 ≪Zymolyase処理あり≫ 【遺伝子名】 Xanthophyllomyces dendrorousからクローニングし、Saccharomyces cerevisiae Y187にプラスミドの状態で導入した配列4種(A-D) 【サンプル】 上記配列を導入したS. cerevisiae Y187のコロニーをつまようじで少量 ...
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実施例 KOD FX 実施例23 新規イネOsSRS3遺伝子の5´領域の単離 【遺伝子名】イネOsSRS3(5’ 領域のGC含量は、約80%) 【サンプル】イネ花芽由来のcDNA 【ターゲット長】2.4kb 【プライマー条件】 Forward 20mer 5’-TCCCGGCCTGACCTCTCTAC-3’ Reverse 20mer 5’-CAAA ...
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実施例 KOD FX 実施例24 ヒト糞便から精製したDNAを用いた Helicobacter pylori cagA遺伝子の増幅 【遺伝子名】 Helicobacter pylori cagA 【サンプル】 ヒトの糞便からQIAmp DNA stool mini kit (QIAGEN)を用い精製したDNA 【ターゲット長】 239bp 【プライマー条件】 1st PCR Forward:AAC ...
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実施例 KOD FX 実施例25 トランスジェニックラット血液(ろ紙血)からのGFP遺伝子の検出 【遺伝子名】 eGFP gene 【サンプル】 Wistarラット 3週令 血液* 【サンプル採取方法】 ろ紙はWhatman社 filter papter1または2( Φ 90mm)使用 【ターゲット長】 171 bp 【プライマー条件*】 Forward: 5'-CACCATCTT ...
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実施例 KOD FX 実施例26 DGGE法を用いた沿岸海域に生息する植物プランクトン(クリプト藻)の多様性の解析 【遺伝子名】PsbA(光化学系II反応中心のD1タンパク ) 特にクリプト藻をターゲットとした 【サンプル】海水の(デュラポア)フィルターろ過サンプル 【サンプル調製方法】 ろ過したフィルターに溶解液*1mLを加え、55℃で1時間処理 →フィルターを除去し、遠心(10, ...
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実施例 KOD FX 実施例27 緑膿菌DNAの遺伝子増幅 【サンプル】緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa K767)の染色体DNA* 【遺伝子名】PA5471 【ターゲット長】約1.5 kb 【プライマー配列*】 Primer F:5’-GCTAGAATTCGATCTACCGTTTCAATCACATGGAT-3’ Primer R:5’-GA ...
