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実施例 KOD FX Neo 実施例5 ワンステップ法で調製した植物ライセートからの増幅 ワンステップ法で調製したタバコの葉のライセートをサンプルとして検討を行いました。今回は、今までの検討で、35サイクルの条件ではあまり増幅の良くなかった、2.2 kb及び4.6 kbのターゲットを増幅しました。その結果、KOD FX Neoを用いることで、明瞭な増幅を確認することができました。 KOD FX N ...
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実施例 THUNDERBIRD Next Probe One-step qRT-PCR 実施例5 マルチプレックス性能評価 4種類の蛍光⾊素で標識したTaqMan® probe を⽤いて、シングル検出とマルチプレックス検出を⽐較しました。鋳型にはHeLa S3 RNA (500ng〜0.05ngの10倍希釈[5段階]) を⽤いました。 解析には バイオラッド社 CFX96 Touch Deep W ...
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実施例 THUNDERBIRD Next Probe One-step qRT-PCR 実施例6 キャリーオーバーによる偽陽性防止 ⾶沫した増幅産物が次のPCRに混⼊したケース(キャリーオーバーコンタミネーション)を想定し、本製品で増幅した産物(196bp) 103, 102コピー相当を鋳型として、UNG処理(+)/(-) の条件で同ターゲットの検出を⾏いました。 解析には Applied Bio ...
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実施例 THUNDERBIRD Next Probe One-step qRT-PCR 実施例7 凍結乾燥前後での性能比較 プライマー・プローブを添加した反応液を凍結乾燥しました(右写真)。 凍結乾燥処理前後で、バイオラッド社 CFX96 Touch Deep Wellにて、1,500, 375, 94, 23, 6 コピーのインフルエンザウイルスRNAの検出を⾏いました。 その結果、凍結乾燥によ ...
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実施例 THUNDERBIRD Probe One-step qRT-PCR 実施例3 多色検出(Multiplex) 系での発現定量 3 種類の蛍光色素で標識したTaqMan® probe を用い、単独検出と、3 種類のTaqMan® probe を一度に用いるMultiplex 検出系にて、IL-β、TNF-α、GAPDH 遺伝子の発現量を解析しました。 実験にはHeLa ...
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実施例 THUNDERBIRD Probe One-step qRT-PCR 実施例4 臨床検体を用いたRS ウイルスA型、及びB 型の同時定量 20 検体の咽頭ぬぐい液から抽出したRNA サンプルを用いて、RT-PCR 法、及びTHUNDERBIRD® One-step qRT-PCR Kit によるqRT-PCR 法によるRS ウイルスの検出を行いました。 また、並行して抗体検査を用いて解析を ...
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実施例 KOD FX 実施例41 微量DNAからのPacBio社 SMRTbell® ライブラリー調製 PacBio社のHiFiシーケンスにおいて、わずか1ngのDNAからシーケンス解析ができるプロトコルが公開され、ライブラリーの増幅にKOD Xtreme Hot start DNA Polymerase*、KOD FXが採用されました。 * KOD Xtreme Hot start DNA Po ...
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実施例 ReverTra Ace qPCR RT Master Mix 実施例6 RNAインプット量を振った際の逆転写効率の他社試薬との比較 ヒト細胞から抽出したtotal RNA 10ng～3μgを鋳型に、ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix [Code No. FSQ-201] または他社の同タイプ(プレミックスタイプ)の製品を用いて、推奨条件にて逆転写反応を ...
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実施例 KOD One 実施例22 微量の DNA から実施できるロングリード DNA メチル化解析手法 東洋紡の試薬を用いて、ウラシルを多く含む酵素処理後の鋳型から長いDNAフラグメントが得られた論文が報告されましたので、一部を紹介させていただきます。 Sakamoto, Y. et al., Long-read whole-genome methylation patterning using ...
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実施例 KOD -Multi & Epi- 実施例7 微量の DNA から実施できるロングリード DNA メチル化解析手法 東洋紡の試薬を用いて、ウラシルを多く含む酵素処理後の鋳型から長いDNAフラグメントが得られた論文が報告されましたので、一部を紹介させていただきます。 Sakamoto, Y. et al., Long-read whole-genome methylation pattern ...
