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実施例 KOD FX 実施例41 微量DNAからのPacBio社 SMRTbell® ライブラリー調製 PacBio社のHiFiシーケンスにおいて、わずか1ngのDNAからシーケンス解析ができるプロトコルが公開され、ライブラリーの増幅にKOD Xtreme Hot start DNA Polymerase*、KOD FXが採用されました。 * KOD Xtreme Hot start DNA Po ...
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実施例 ReverTra Ace qPCR RT Master Mix 実施例6 RNAインプット量を振った際の逆転写効率の他社試薬との比較 ヒト細胞から抽出したtotal RNA 10ng～3μgを鋳型に、ReverTra Ace® qPCR RT Master Mix [Code No. FSQ-201] または他社の同タイプ(プレミックスタイプ)の製品を用いて、推奨条件にて逆転写反応を ...
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実施例 KOD One 実施例22 微量の DNA から実施できるロングリード DNA メチル化解析手法 東洋紡の試薬を用いて、ウラシルを多く含む酵素処理後の鋳型から長いDNAフラグメントが得られた論文が報告されましたので、一部を紹介させていただきます。 Sakamoto, Y. et al., Long-read whole-genome methylation patterning using ...
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実施例 KOD -Multi & Epi- 実施例7 微量の DNA から実施できるロングリード DNA メチル化解析手法 東洋紡の試薬を用いて、ウラシルを多く含む酵素処理後の鋳型から長いDNAフラグメントが得られた論文が報告されましたので、一部を紹介させていただきます。 Sakamoto, Y. et al., Long-read whole-genome methylation pattern ...
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実施例 KOD FLEX 実施例3 クルードサンプル(血液)からの増幅 血液をテンプレートとして、WT-1遺伝子(2.5kb)を増幅しました。 KOD FLEX™ PCR Master Mix では血液の影響を受けることなく、反応液に対して30%の血液を添加しても増幅を確認できました。 【PCRサイクル】 KOD FLEX™PCR Master Mix 弊社従来品PCR酵素 ...
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実施例 KOD FLEX 実施例4 さまざまなターゲットの増幅 ヒトゲノムをテンプレートとして、8種のターゲットを増幅しました。他社製品では増幅が見られない場合や非特異的な増幅が生じているところ、 KOD FLEX™ PCR Master Mixは良好な増幅が確認されました。 KOD FLEX 製品ページ 実施例一覧ページ
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実施例 KOD FLEX 実施例5 マルチプレックスPCR ヒトゲノムをテンプレートとして、マルチプレックスPCRを実施しました。短鎖のターゲットから徐々にマルチプレックス数を増やし、反応の効率、及び特異性を評価しました。 その結果、他社製品では増幅しないターゲットが見られるところ、KOD FLEX™ PCR Master Mix では目的のマルチプレックス数のバンドが確認できました。 ...
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実施例 KOD FX Neo 実施例6 ジャム(食品)添加実験 加工食品の一例として、ジャムの懸濁液をPCR反応液に添加してPCRの阻害の検討を行いました。果物には、多糖をはじめとするPCRを阻害する物質が含まれています。 その結果、KOD FX Neoが最も阻害に強いことが明らかとなりました。 KOD FX Neo製品ページ 実施例一覧ページ
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実施例 RT-RamDA 実施例3 微量RNAからのcDNA合成 NIH3T3 から抽出したTotal RNA 10pgを用い、RT-RamDA® cDNA Synthesis Kit [Code No RMD-201] とA社qPCR用逆転写キットにて cDNAを合成しました。 このcDNAを鋳型にTHUNDERBIRD® SYBR™ qPCR Mix[Code No QPS-201 ...
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実施例 KOD FX Neo 実施例4 フミン酸添加実験 フミン酸(humic acid)とは、腐植土や土壌などに存在する赤褐色または黒褐色の有機物であり、PCRを阻害することが知られています。通常行われるDNAの精製ではこのフミン酸は除くことはできません。そのため、環境・生態系サンプルを鋳型としたPCRはとても難しいとされています。 ここでは、例としてヒトゲノムDNAにフミン酸を混合し、PCRの ...
