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実施例 ReverTra Ace 実施例3 14kbのcDNA合成反応 Human骨格筋poly(A) RNAを鋳型に、ジストロフィンmRNAの3'側に特異的なcDNA合成用Primerを用いて、42℃、30min.にてcDNA合成反応を行いました。その後、mRNAの5'側に特異的なPCR用Primer Set(cDNA合成用Primerより14kb上流)を用いて、KOD Dash ...
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実施例 ReverTra Ace 実施例4 GC-richターゲットからのcDNA合成 HeLa細胞より調製したtotal RNA (DNase処理済み)を鋳型にハンチンチンmRNAおよびKIAA0296 (かずさDNA研究所cDNAバンクより引用) mRNA の3'側に特異的なprimerを用いcDNA合成反応を行いました。それぞれを鋳型として各mRNAの5'側に特異的なprim ...
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実施例 ReverTra Ace 実施例5 反応効率・伸長性能と逆転写反応温度の検討 「ReverTra Ace®」の反応効率、および伸長性を確認するために、高次構造を取りやすく、逆転写が難しいとされる18SリボソームRNAを鋳型とした逆転写反応において、他社の逆転写酵素と比較を行いました。 【実験方法】 (1)使用酵素 ・ReverTra Ace® [Code No.TRT-101]、100U/ ...
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実施例 Can Get Signal immunostain 実施例6 アフリカツメガエルの卵巣染色での従来法との比較検討(免疫染色) 【データご提供】 兵庫県立大学大学院 生命理学研究科 織井 秀文先生 【実験方法】 (1)サンプルの由来:アフリカツメガエルの卵巣 (2)サンプル調製法:Paraffin Embedded Section (3)実験フロー 1. ブアン氏の固定液による固 ...
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実施例 KOD Dash 実施例2 マルチPCRによるSTECの病原性関連遺伝子の検出 O157:H7に代表される志賀毒素産生性大腸菌(STEC)は強い感染力と病原性を有し、深刻な疾病を引き起こす危険な細菌である。近年、本菌が猛威を振るい、これまでに死亡例を含め多数の患者が発生している。STECの最も重要な病原因子である志賀毒素(ベロ毒素)は、免疫学的性状や分子量の異なるStx1およびStx2に大 ...
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実施例 Blend Taq 実施例5 ランダム配列の増幅 PCR用酵素を利用して核酸配列の増幅を行う場合、増幅されやすい配列と増幅されにくい(あるいはされない)配列があります。増幅する配列の“好き嫌い”の少ない酵素を使用することで、未知配列のクローニング成功率を高めたり、PCR条件の統一化が容易になります。今回はBlend Taq® -Plus-によるランダム配列の増幅につ ...
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実施例 Blend Taq 実施例6 TAクローニングによる形質転換効率 human β-globin gene 582bpをターゲットにしてBlend Taq®、Blend Taq® -Plus-、rTaqを用いてPCRを行いました。得られたPCR産物をP社TAクローニングキットを用いてライゲーション反応を行い(16℃、1時間)、Competent high DH5αを形質 ...
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実施例 MultiReporter Assay System –Tripluc– 実施例2 タンパク質半減期の短縮の確認 SLO、SLO(PEST)、SLR、SLR(PEST)を発現するCHO細胞をシクロヘキシミド処理しました。残存発光活性をMultiReporter Assay System -Tripluc®- Detection Reagents*を用いて測定し、相対活性をプロットしました。 ...
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実施例 Can Get Signal immunostain 実施例7 ラット頸動脈バルーンインジャリーモデルの新生内膜におけるR-Ras発現解析の比較検討(免疫染色) 【データご提供】 名古屋大学医学部付属病院 循環器内科学 三宅裕史先生、前田健吾先生 【実験方法】 (1)サンプルの由来:SDラット、頸動脈 ※抗原タンパク質の発現誘導の有無:あり 2F Fogartyカテーテルで頸動脈 ...
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実施例 MultiReporter Assay System –Tripluc– 実施例3 転写因子AP1、NFκB活性化の同時解析 MultiReporter Assay System -Tripluc®- (以下Tripluc®システム)は、緑色(SLG)、橙色(SLO)、及び赤色(SLR)の3色のルシフェラーゼを用いるマルチリポーターアッセイシステムです。1色を内部標準として、残りの2色を用 ...
