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実施例 KOD One 実施例16 ニワトリ遺伝子のクローニング用サンプル調製 データご提供 : 岡山大学 大学院医歯薬学総合研究科 細胞組織学分野 佐藤 恵太 様 <実験の目的> ニワトリの cDNA配列を単離する。 <実験方法> 【サンプルの種類】 ニワトリE17胚 眼組織から調製した1st strand cDNA 【サンプルの調製方法】 ニワトリE17胚 眼組織からニ ...
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実施例 Can Get Signal 実施例8 ウシ初期胚サンプルからのDNMT1の検出(ウェスタンブロット) M : 分子量マーカー 1, 2: ウシ体細胞核移植胚(8-32細胞期) 30個/Lane 【実験方法】 1. サンプル 牛体細胞核移植胚 8-32細胞期 ※1 Laneに受精卵30個相当を アプライした 2. ターゲット DNMT1 (180 kDa) 3. タンパク質のウェスタン ブ ...
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実施例 KOD One 実施例17 ワンステップ法で調製した植物ライセートからの増幅 ワンステップ法にて調製したタバコ葉ライセートを用い、KOD One® PCR Master Mix (色素なし,入り) および従来品で、rbcL遺伝子の増幅比較を行いました。 ※ワンステップ法でサンプル調製を行った場合、植物組織は完全には溶解しません。 【ターゲット遺伝子名と長さ】 rbcL / 1.3kb 【 ...
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実施例 KOD One 実施例18 フミン酸耐性の確認 フミン酸(humic acid)とは、腐植土や土壌などに存在する赤褐色または黒褐色の有機物であり、PCRを阻害することが知られています。通常行われるDNAの精製ではこのフミン酸は除くことはできません。そのため、環境・生態系サンプルを鋳型としたPCRはとても難しいとされています。 そこで KOD One® PCR Master Mix および各 ...
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実施例 KOD One 実施例19 高速PCRによる 17.5～40kbの長鎖ターゲットの増幅 KOD One® PCR Master Mix および他社PCR酵素を用い、ヒトゲノムDNAをテンプレートとして長鎖ターゲットの増幅を行いました。 【プライマー配列】 ターゲット 17.5kb HBB Forward Primer TGCACCTGCTCTGTGATTATGACTATCCCACAGTC ...
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実施例 Can Get Signal 実施例9 ミリポア社タンパク質免疫検出装置「SNAP i.d.」と免疫反応促進試薬「Can Get Signal®」を用いる迅速・高感度ウェスタンブロット 【データご提供】 神戸大学大学院 農学研究科 生命機能科学専攻 生物化学研究室 小島志織様、金丸研吾先生 当研究室で行っているSNAPi.d.(ミリポア社製)と免疫反応促進試薬Can Get Signal® ...
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実施例 RamDA-seq 実施例3 カバレッジの均一性の確認 mES total RNA 10pg から GenNext®RamDA-seq® Single Cell Kit [Code No. RMD-101] にて、cDNA、 二本鎖DNAを調製し、次世代シーケンサー解析を行いました。 解析にはillumina® MiSeq® を使用しました。その結果、調製したライブラリーがおおむね遺伝子全 ...
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実施例 RamDA-seq 実施例4 長鎖RNAにおけるcDNA合成の比較 mES total RNA 10pgからGenNext® RamDA-seq® Single Cell Kit [Code No. RMD-101] およびA社キットにて、cDNA、二本鎖DNAを合成し、次世代シーケンサー解析を行いました。解析にはillumina® MiSeq®を使用しました。その結果、GenNext® ...
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実施例 RamDA-seq 実施例5 検出転写産物数の比較およびRNA種類別リード数の検証 mES total RNA 10pgからGenNext® RamDA-seq® Single Cell Kit [Code No. RMD-101] およびA社キットにて、cDNA、二本鎖DNAを合成し、次世代シーケンサー解析を行いました。GenNext® RamDA-seq® Single Cell Ki ...
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実施例 RamDA-seq 実施例6 ランダムプライマーおよびNSR プライマー を用いた場合の rRNA混入率の比較 cDNAを合成する際に、通常のランダムプライマーを用いた場合と、NSR(Not so random) プライマー を用いた場合の rRNA混入率の比較を行いました。 【実験方法】 GenNext® RamDA-seq® Single Cell Kit [Code No. RMD- ...
