Blend Taq^®, Blend Taq^® -Plus-

本製品は、Barnesらの方法をベースに開発された高性能TaqDNA polymeraseです。

rTaq DNA Polymeraseと校正活性をもつDNA polymeraseを最適な割合で混合することにより、増幅効率、伸長性に優れたPCRを行うことができるように調製されており、通常のTaq DNA polymeraseに比べ、飛躍的にPCRパフォーマンスが向上しています。

さらに、Blend Taq^® -Plus-は、酵素溶液に抗Taq抗体を混合することによるホットスタート法を採用しており、さらに感度と特異性が向上しています。

●優れたPCRパフォーマンス
通常のTaq DNA polymeraseに比べ、PCRにおける増幅効率、及び伸長性が向上しています。(実施例1, 2)

●TAクローニング対応
本酵素のPCR産物はTAクローニング可能です。正確性はTaq DNA polymeraseの約3倍程度です。

●簡単な条件設定
Taq DNA polymeraseがベースとなっており、一般的なTaqのサイクル条件を用いることができます。

●ホットスタートPCRでPCRパフォーマンス向上「Blend Taq^® -Plus-」
Blend Taq^® -Plus-はホットスタートPCRに対応しており、さらに感度と特異性が向上しています。

1.微量サンプルを鋳型とした増幅効率の評価

ヒトゲノムDNAを段階希釈したものを鋳型として、human β-globin 遺伝子3.6Kbの増幅を試みました。
その結果、Blend Taq^®およびBlend Taq^® -Plus-では、ゲノムDNA 5ngを鋳型とした場合でも明瞭な増幅を確認でき、他社混合型酵素と比べて優れた増幅効率を示しました。


 

2.種々のサイズの遺伝子をターゲットとした伸長性の評価

human β-globin gene およびhuman Myosin heavy chain geneの異なる長さのものをそれぞれ用意し、ターゲットとしました。PCR用酵素として、Blend Taq^®、Blend Taq^®-Plus-および他社ブレンド型酵素を使用してPCRを行いました。種々の量のゲノムDNAと15pmolesのプライマーを用い、50 μL の系で酵素を1.25U、他社ブレンド型酵素では各社推奨容量を使用しました。

その結果、Blend Taq^®、Blend Taq^® -Plus-はターゲット長が23.0kbでも良好な増幅が認められ、他社ブレンド型酵素に比べ、優れた伸長性を示しました。

実施例3: ターミナルトランスフェラーゼ活性に影響する要因について
実施例4: コロニーダイレクトPCRによるインサートチェック
実施例5: ランダム配列の増幅
実施例6: TAクローニングによる形質転換効率
実施例7: PC12細胞からの細胞分化因子のRT-PCR
実施例8: 微細緑藻遺伝子のPCR
実施例9: ES細胞からのRT-PCR
実施例10: 酵母からのコロニーダイレクトPCR
実施例11: マガキのミトコンドリア領域のPCR
実施例12: マウステールゲノムのPCR
実施例13: オリゴキャッピング法による完全長遺伝子の増幅

1) W. M. Barnes, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91: 2216-2220(1994)

製品使用文献:
1) E. Higashi et al., Drug Metab Dispos, 35(10): 1935-1941.(2007)
https://doi.org/10.1124/dmd.107.016568
2) I. Ogiwara et al., J. Neurosci., 27 (22): 5903-5914.(2007)
https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.5270-06.2007
3) I. Nishimura et al., Endocrinology, 149(2): 774-782.(2008)
https://doi.org/10.1210/en.2007-0759