リアルタイムPCRの測定レンジ、特異性、コスト等のお悩みを解消します。

高効率リアルタイムPCR Master Mix THUNDERBIRD® qPCR Mix シリーズ

価格表

THUNDERBIRD® Probe qPCR Mix

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
QPS-101 1.67ml×3本 ¥29,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
QPS-101T 1ml×1本 ¥8,500 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
QPS-101X5 (1.67ml×3本)×5 ¥133,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し

THUNDERBIRD® SYBR qPCR Mix

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
QPS-201 1.67ml×3本 ¥29,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
QPS-201T 1ml×1本 ¥8,500 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
QPS-201X5 (1.67ml×3本)×5 ¥133,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し

THUNDERBIRD® Probe qPCR RT Set

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
THUNDERBIRD Probe qPCR/RT Set QPS101/FSQ101 QPS-101とFSQ-101のセット ¥63,000 -20℃ 該当無し
THUNDERBIRD Probe qPCR/RT Set II QPS101/FSQ201 QPS-101とFSQ-201のセット ¥63,000 -20℃ 該当無し
THUNDERBIRD Probe qPCR/RT Set III QPS101/FSQ301 QPS-101とFSQ-301のセット ¥65,000 -20℃ 該当無し

THUNDERBIRD® SYBR qPCR RT Set

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
THUNDERBIRD SYBR qPCR/RT Set QPS201/FSQ101 QPS-201とFSQ-101のセット ¥63,000 -20℃ 該当無し
THUNDERBIRD SYBR qPCR/RT Set II QPS201/FSQ201 QPS-201とFSQ-201のセット ¥63,000 -20℃ 該当無し
THUNDERBIRD SYBR qPCR/RT Set III QPS201/FSQ301 QPS-201とFSQ-301のセット ¥65,000 -20℃ 該当無し

用途

●リアルタイムPCR
 

説明

THUNDERBIRD® qPCR Mixは、Taq DNA polymeraseをベースとして開発された、高効率リアルタイムPCR用マスターミックス(2×濃度)で、Realtime PCR Master Mixシリーズの改良品です。
cDNAやウイルスDNAをサンプルとしたリアルタイムPCR解析に適しています。TaqMan®アッセイなどのプローブアッセイ、及びSYBR® Green I アッセイに対応する2種類のキットから選択することができます。
本製品は、新規エンハンサーの採用を含め、組成を根本的に見直すことによって、反応特異性とPCR効率が飛躍的に向上しています。これらの改良によって、幅広い定量可能域(ダイナミックレンジ)を実現するとともに、ブロックタイプやガラスキャピラリータイプ等、様々な機器に対応しています。また、大幅なコストダウンに成功しました。
 

特長

●様々なターゲットを均一に検出

ターゲットごとのPCR効率のばらつきを最小限に抑える効果のある新規なエンハンサーを採用しました。


 

●広いレンジで検出可能

特異的、かつ高効率な増幅により、広い測定レンジでの解析が可能になりました。


 

●高い特異性(プライマーダイマーの低減)

組成最適化により、PCRの特異性が向上しました。非特異反応の低減によって、SYBR® Green I、及びTaqMan®アッセイにおいて、低コピー数のターゲットの検出感度が向上しました。(実施例 御参照)
 

●高純度なTaq DNA polymeraseを使用

PCRの基本性能の改善を図っております。
 

●様々な機器に対応

機種別プロトコール: Probe版 SYBR版

一般的なブロックタイプの機器(Fast Modeにも対応)のほか、ガラスキャピラリーを用いる高速サイクラーにも対応しています。
また、50X ROX reference dyeが別添付されているため、パッシブリファレンスを使用する機器(Applied Biosystems® 社製機器、Stratagene社製機器など) においても、各機種の特性に応じた最適なROX濃度でご使用いただけます。


 

●高速ホットスタート

抗Taqポリメラーゼ抗体を用いるホットスタートシステムを採用しています。抗体は加熱により速やかに失活するため、最初の変性時間を短時間に設定できます。
 

●高いコストパフォーマンス

実験のランニングコストを大幅に抑えることが可能になりました。

実施例

SYBR® Green I検出系による反応特異性の比較

プライマーダイマーが発生しやすいプライマーセットを用いて、各リアルタイムPCR試薬による反応特異性の比較を行いました。
プライマーセットは、ヒトβ-Actin cDNAに対するもの、鋳型には弊社の高性能逆転写反応用試薬「ReverTra Ace® qPCR RT Kit [Code No. FSQ-101]」により合成したHeLa細胞Total RNA由来cDNAを用い、cDNAの10倍段階希釈液(4段階)と、no-template control(NTC)について、それぞれduplicateにて反応を実施しました。( Roche Diagnostics LightCycler® 1.1使用)



 

参考文献

1) R.M. de Breuil et al., PCR Methods Appl., 3 : 57-59 (1993)
2) P.M. Holland et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88 : 7276-7280 (1991)

製品内容

【QPS-101T,QPS-201T】
qPCR Mix 1ml×1本
50X ROX reference dye 50μl
(50μl反応で40回用、20μl反応で100回用となります)

【QPS-101,QPS-201】
qPCR Mix 1.67ml×3本
50X ROX reference dye 250μl
(50μl反応で200回用、20μl反応で500回用となります)

 

基本反応条件

〈SYBR® Green I アッセイ〉
滅菌水 Xμl
qPCR Mix 10μl
Forward Primer 6pmoles
Reverse Primer 6pmoles
50X ROX referencre dye
0.4/0.04μl*
DNAサンプルYμl
Total Volume 20μl

*50X ROX reference dyeは、Applied Biosystems®社製機器など、ウェル間の蛍光強度および分注誤差補正のためにパッシブリファレンスを用いる機器での反応の際に添加してください。また、補正を行わない機器では添加する必要はありません。

Cycle
〈2ステップの場合〉
95℃, 20~60sec.

95℃, 1~15sec
60℃, 30~60sec.
40 cycles
〈3ステップの場合〉
95℃, 20~60sec.

95℃, 1~15sec
55~65℃, 5~30sec.
72℃, 30~60sec.
40 cycles

※アニーリング温度は、プライマーのTmと同じ温度からTm-5℃の範囲に設定してください。
※伸長時間は、標的配列が300bp以下の場合は30秒で十分に反応が進行しますが、一部の機器では、安定した蛍光測定に30秒より長い時間を必要とする場合があります。増幅曲線のがたつきや、ウェル間の変動が大きい場合には、長めの時間(45~60秒)を設定してください。

 


 


 

備考

LightCycler® は、Idaho Technology Inc.の商標です。
SYBR® は、Molecular Probes Inc.の登録商標です。
TaqMan® は、Roche Molecular Systems Inc.の登録商標です。
ABI PRISM® は、Applied Biosystems® Inc.の登録商標です。

 

ワンポイントアドバイス

●保存について
凍結融解の繰り返しは、10回程度では品質に影響がないことが確認されています。

●逆転写反応溶液の持込について
一般的な逆転写反応用試薬などを用いて合成したcDNA液を、精製せずに滅菌水などで適宜希釈して、そのままリアルタイムPCR反応液に添加してご使用いただくことができます。
添加量は反応液量の10%を上限の目安としてください。ReverTra Ace® qPCR RT Master MixシリーズやReverTra Ace® qPCR RT Kitを用いる場合は、反応溶液を20%まで持ち込むことが可能です。

 

関連商品

●リアルタイムPCR用cDNA合成キット

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
ReverTra Ace qPCR RT Kit FSQ-101 200回用
(10μl反応)
¥38,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
ReverTra Ace qPCR RT Master Mix FSQ-201 200回用
(10μl反応)
¥38,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
ReverTra Ace qPCR RT Master Mix with gDNA Remover FSQ-301 200回用
(10μl反応)
¥40,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
※1 法規制について
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
: 消防法に基づく危険物です。
: 御購入時に申込書の提出が必要な製品です。
: 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」 (カルタヘナ法)に基づく組換え体または昆虫細胞組換え体で生産されたタンパク質です。
該当なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品です。