MagExtractor™ –RNA-

培養細胞や組織などの生体サンプルから高純度のTotal RNAを抽出するためのキットです。回収したTotal RNAは、主にRT-PCRなどに使用できます。
磁性シリカビーズに、破砕溶液中のTotal RNAを吸着させて回収する方法を原理としているため、従来のAGPC法に必要であったフェノールなどの有害な試薬による除タンパク操作やエタノール沈殿操作、高速回転による遠心分離操作が不要です。
本キットは、磁性ビーズ分離用スタンドを用いて使用できます。

●さまざまなサンプルに対応

培養細胞、組織、酵母などから高効率にTotal RNAを抽出することができます。Total RNAには主にrRNAとmRNAが含まれます。
 

●簡便・短時間

磁性シリカビーズへのTotal RNAの吸着を基本原理としており、簡便に短時間でTotal RNAを抽出することができます。
 

●高純度のTotal RNA精製が可能

 

1.収量と純度の検討

ヒト細胞株HL60細胞2×10⁶cellsをサンプルとして、本キットと一般的なRNA抽出法であるAGPC法によりTotal RNA抽出を行いました。その結果、本キットによる抽出において、収量はフェノールを用いるAGPC法とほぼ同等な結果が得られ、泳動パターン及びO.D.比より、タンパク質やDNA等の不純物の混入がほとんどなく、高純度のRNAが抽出できたことが分かりました。


 

2.抽出RNAのRT-PCR

ヒト細胞株HeLa細胞2×10⁶cellsから抽出したTotal RNAのうち、1μgを使用してTransferrin receptor mRNAをターゲット(2,115bp)としてRT-PCRを行いました。その結果、逆転写反応を行った場合にのみターゲットの増幅がみられ、比較的発現量が低いことが知られているTransferrin receptor遺伝子の発現を確認することができました。

 

3.ラット組織からの抽出

ラットの各組織より本キットを用いて、Total RNAの抽出を行いました。抽出は、50〜100mgの組織を液体窒素にて凍結した後、ハンマーで砕き、氷冷した溶解・吸着液(2−ME含有)750〜900μL中でペッスルを用いて充分にホモジナイズし、その上清を用いて抽出を行いました。その結果、組織のホモジナイズ上清から本キットを用いて高品質のRNAが抽出できることが分かりました。


 

1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)