MagExtractor™ -Genome-

    磁性シリカビーズを用いて血液や培養細胞、組織などから
    高純度ゲノムDNAを抽出するためのキットです。
    本キットは、タンパク質変性剤(カオトロピック剤)中で磁性
    シリカビーズに破砕溶液中のゲノムDNAを吸着させて回収
    する方法を原理としているため、フェノールなどの有害な
    試薬による除タンパク質操作やエタノール沈殿操作・高回転
    の遠心分離操作が不要であり、簡便に抽出することができ
    ます。
回収したゲノムDNAは、主にPCRなどの酵素反応に直接使用できます。
本キットは、磁性ビーズ分離用スタンドを用いて全血から直接DNA抽出を行うことができるので、白血球の分離操作は不要で簡便です。

●簡便に短時間で抽出

磁性シリカビーズへのゲノムDNAの吸着を基本原理としており、簡便に短時間でゲノムDNAを抽出することができます。
 

●安全

有害なフェノール/クロロホルム処理を必要としません。
 

●高純度のゲノムDNA精製が可能
抽出されたゲノムDNAは、さまざまな実験に直接使用することができます。
 

●さまざまなサンプルに対応

全血、動物培養細胞、動物組織、及びマウステールなどから直接ゲノムDNAを抽出することができます。

1.収量と純度の検討

　全血100μLから、本キットと他社キットを用いてゲノムDNA抽出を行いました。本キットによる抽出においては、他社キットとほぼ同等の収量が得られました。また、純度においては、A社やC社のキットではタンパク質やRNA等の不純物の混入が認められましたが、本キットでは認められませんでした。本キットを使用することによって、全血などの生体サンプルから高純度のゲノムDNAを抽出することができました。


 

2.抽出DNAのPCR例

　10人の血縁関係のない健常人から採取した全血100μlから、本キットを用いてゲノムDNAを抽出しました。その結果、A260nm/280nmが1.83〜1.84の高純度のゲノムDNAを、約1.4〜2.2μg抽出することができました。
　次に、ゲノムDNA抽出後、全量の1/20を使用してTaq DNA PolymeraseによりシングルローカスVNTR部位であるMCT118をターゲットにPCR解析を行いました。MCT118は、16塩基の繰り返し配列からなり、この繰り返し数を測定することで個人識別を行うことができます。その結果、各個人に特異的なバンドを検出することができました。


 

3.ラット組織からのゲノムDNAの抽出、およびPCR解析例

　-80℃凍結切片5mgを本キットの溶解・吸着液中でホモジナイズした後、その遠心上清から、本キットを用いてゲノムDNAの抽出を行いました。その結果、それぞれ2.3μg、1.6μgのゲノムDNAを得ることができました。260nm/280nmはそれぞれ1.86、1.83でした。また、抽出したDNAを用いてTaq DNA PolymeraseによりTNF-α遺伝子(482bp, 1226bp)を増幅した結果、良好な結果を得ることができました。

1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)