新型コロナウイルス検出用1-step RT-PCR Kit

SARS-CoV-2 Detection Kit

TOYOBO

価格表

SARS-CoV-2 Detection Kit

品名 Code No. 包装 価格(税別) 保存温度 説明書
仕様書
SDS 法規制
SARS-CoV-2 Detection Kit -N1 set-
NCV-301 100回用 ¥90,000 -20℃ 危
SARS-CoV-2 Detection Kit -N2 set-
NCV-302 100回用 ¥90,000 -20℃ 危
SARS-CoV-2 Detection Kit -N1 set- /-N2 set-
NCV301/NCV302 NCV-301とNCV-302のセット(各100回用) ¥98,000 -20℃ 危

用途

●唾液、咽頭/鼻咽頭ぬぐい液などのサンプルからの新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)遺伝子の検出

※本キットは研究用試薬です。医薬品医療機器法に基づく体外診断用医薬品としての承認・認証等を受けておりません。
 

説明

本製品は、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)検出のためのリアルタイム1-step RT-PCRキットです。RNA精製作業は不要で、試料を前処理液と混合し熱処理したのち、リアルタイム1-step RT-PCR反応に供し、ウイルスRNAを検出します。
検出のためのプライマー、プローブは、アメリカ疾病予防管理センター(CDC)発行「2019-Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-time rRT-PCR Panel Primers and Probes」(Effective: 24 Jan 2020) に記載されている、N1セット[Code:NCV-301]、N2セット[Code:NCV-302]を採用しています。
当社従来品[Code:NCV-101, NCV-102]の仕様を変更したことにより、咽頭/鼻咽頭ぬぐい液、ウイルス培養液の他、PBS懸濁上清や酵素処理した唾液などからも検出が可能となりました。

仕様変更前の製品の詳細はこちら

本製品は、SARS-CoV-2 RNA を個別に検出するKitです。2領域と内部標準を同時に検出する SARS-CoV-2 Detection Kit -Multi-[NCV-403]もございます。同時検出の場合は、FAM、ROX、Cy5の3波長が測定可能なリアルタイムPCR装置が必要になります。

特長

●迅速
試料から最短60分以内で新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)の検出が可能です。

●簡便
核酸を精製する必要はありません。試料(咽頭/鼻咽頭ぬぐい液、唾液、ウイルス培養液など)と前処理液を混合、熱処理をするだけで、PCRを行うことが可能です。

試料の持ち込み許容量をアップ
仕様変更前[Code:NCV-101, NCV-102]では試料の持ち込み量が3μLでしたが、本製品では6μLまで試料の持ち込みが可能となりました。

●さまざまなリアルタイムPCR装置に対応
FAMチャネルが測定可能なリアルタイムPCR装置にてご使用になれます。

●キャリーオーバーコンタミネーションによる偽陽性のリスクを低減
酵素液にUracil-DNA Glycosylase(UNG)を含有しており、誤って混入した増幅産物を分解するため、キャリーオーバー汚染による偽陽性を防止します。

実施例

陽性コントロールの検出例

以下の陽性コントロールRNA  および陰性コントロールを基本反応条件に従いCFX96 Touch Deep Well にて検出しました。

(1) Bio-Rad EDX SARS-CoV-2 Standard
(2) (株)日本遺伝子研究所 米国CDC Real-time RT-PCR N1/N2 PC mix

製品内容
【NCV-301】  
前処理液 1,000μL×1本
反応液 1,100μL×3本
酵素液 550μL×1本

プライマー・プローブ液 N1 set

550μL×1本

【NCV-302】  
前処理液 1,000μL×1本
反応液 1,100μL×3本
酵素液 550μL×1本

プライマー・プローブ液 N2 set

550μL×1本
注意事項

 試料の組成およびリアルタイムPCR装置によっては検出感度に影響する可能性がございます。ご使用になる試料を添加した反応液に対し、陽性コントロールRNAのスパイク試験を行い、検出感度を事前に確認してください。

陽性コントロールや陰性コントロールも前処理液と混合してRT-PCR反応にご使用ください。前処理液をRT-PCR反応液に添加していない場合、増幅性が低下します。

「病原体検出マニュアル 2019-nCoV 4. TaqMan プローブを用いたリアルタイムone-step RT-PCR法による2019-nCoVの検出」に掲載されておりますNセット用、N2セット用の陽性コントロール(国立感染症研究所から配布されているものおよび同等の市販品)は、本キットではご使用になれません。

試料やコントロールを加える前の前処理液のみでの加熱は行わないでください。

基本反応条件
①前処理  
  前処理液 3μL
  試料またはコントロール 6μL
  Total 9μL

熱処理 95℃、5min. 


②RT-PCR反応液  
  反応液 30μL
  酵素液 5μL
  プライマー・プローブ液 5μL
  前処理済:試料または
               コントロール
9μL
  Total 49μL
 

サイクル条件①
<Roche> LightCycler®96,  
  LightCycler®480 Instrument II
<Bio-Rad> CFX96 Touch Deep Well
<ABI> StepOnePlus*
         
  逆転写反応 42℃ 5min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  会合
  伸長
95℃
50℃
55℃
1sec.
3sec.
10sec.
45~50
cycles
 (検出)        

* ROX補正をはずし、Standard Mode で実施してください。


サイクル条件②
<ABI> 7500Fast**
         
  逆転写反応 42℃ 5min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  会合
  伸長
95℃
50℃
55℃
1sec.
3sec.
30sec.
45~50
cycles
 (検出)        

** ROX補正をはずし、Standard Mode で実施してください。
装置の反応容量は30μLに設定してください。


サイクル条件③
<ABI> QuantStudio 5*
         
  逆転写反応 42℃ 5min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  伸長
95℃
55℃
5sec.
25sec.
45~50
cycles
 (検出)        

* ROX補正をはずし、Standard Mode で実施してください。

※上記以外のリアルタイムPCR装置でもご使用になれます。(TaKaRa : DiceIIIなど)
装置により、最適なサイクル条件が異なりますので、条件を記載していない機器は東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。 

ワンポイントアドバイス

試薬は、すべて-20℃保存ですが、前処理液は解凍後、室温保存も可能です。

RT-PCR反応終了後は反応液が白濁しておりますが、検査結果には影響しません。

FAQはこちら →

陽性コントロール、前処理方法などはFAQをご覧ください。

 トラブルシューティングは
こちら

※ 法規制について
毒: 毒物及び劇物取締法[医薬用外毒物]
国: 国民保護法[毒素]
劇: 毒物及び劇物取締法[医薬用外劇物]
組: カルタヘナ法(遺伝子組換え生物等の使用等の規制による
危: 消防法[危険物]
   生物の多様性の確保に関する法律)
P: PRTR法(化学物質排出把握管理促進法)[届け出義務物質]
申: ご購入時に申込書の提出が必要な製品
労: 労働安全衛生法[通知または表示義務物質]
なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品

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