Quick Taq^® HS DyeMix

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本試薬は、Taq DNA Polymeraseを含む2×マスターミックス(ホットスタート対応、電気泳動色素入り)です。
鋳型DNAとプライマーを入れるだけで直ちにPCRを実施することができ、反応溶液をそのまま電気泳動解析に供することができます。
抗Taq抗体がマスターミックスにあらかじめ混合されており、ホットスタート効果により、特異性の高い、高効率な増幅が期待できます。

●2×プレミックス(色素入り)
2×マスターミックスであり、プライマーを加えるだけで便利にご使用いただけます。色素(BPB)入りなので、PCR後にそのままゲルにアプライ可能です。

●優れたPCR性能
最適化されたバッファー組成および高純度のTaq DNA polymeraseの使用により、従来のTaq DNA polymeraseに比べPCR性能が向上しています。

●ホットスタートPCR対応
抗Taq DNA polymerase抗体によるホットスタート法を採用しており、高い感度と特異性を示します。

●高い保存安定性
凍結融解30回、4℃保存3ヶ月間において安定性を確認しています。

●コストパフォーマンス良好
安価な価格帯 (2.5mL:￥9,800 ー 50μLで反応を行った場合、100回使用可能) に設定されていることから、気軽に高効率なPCRを行うことができます。

1. コロニーダイレクトPCRを用いたインサートチェック

500bpのインサートを有するプラスミドpTA2で形質転換した大腸菌DH5αのコロニーをサンプルとして、ベクター上に設計したプライマーを用いてPCRを行いました。
その結果、インサートサイズに応じた明瞭なバンドを得ることができました。
本試薬は、コロニーダイレクトPCRにおいても、力を発揮することが分かりました。


 

2. ヒトp53遺伝子(2.9 kb)の増幅

ヒトゲノムDNA (50ng) を鋳型として、比較的増幅の難しいとされるヒトp53遺伝子(2.9kb)の増幅を実施しました。
その結果、Quick Taq^® HS DyeMixを用いた場合、最も高効率、かつ特異性の高い結果を得ることができました。
また、ホットスタート法を用いなかった場合(レーン3.および4.)、特異性および感度の低下が見られることが分かりました(Quick Taq^® HS DyeMixはHot start法に対応しています)。


 

3. さまざまな条件における増幅効率の比較

ヒトゲノムDNA (50ng)、及び大腸菌コロニーを鋳型として、ヒトβ-globin遺伝子(1.3kb, 3.6kb)、及びプラスミドインサート(3.9kb)の増幅を実施しました。
反応は、それぞれの試薬の至適条件に従って実施しました。
その結果、Quick Taq^® HS DyeMixを用いた場合、高効率、かつ特異性の高い結果を得ることが可能でした。

その他の実施例
実施例4: 増幅産物を用いた直接制限酵素処理

 

1) F. C. Lawyer et al., J. Biol. Chem., 264: 6427-6437(1989)
2) D. E. Kellogg, et al., BioTechniqus, 16: 1134(1994)