実施例

KOD One 実施例5 イノシンを含むプライマーを用いた増幅

イノシンを含む縮重プライマーを用いて、KOD -Plus- Neo(従来品)との増幅を比較しました。その結果、KOD One^® PCR Master Mix(色素なし, 入り)でのみ明確なバンドを確認することができました。本製品を用いることで、従来の高正確性PCR酵素では使用できないイノシンを含む縮重プライマーから、正確に遺伝子を増幅することができます。

		【反応液組成】               【PCRサイクル】          (μL)         98℃  10sec.   30cycles   滅菌蒸留水  17          60℃   5sec.   KOD One® PCR Master Mix/-Blue-  25         68℃  15sec.   100pmol/μL Primer F    1.5*          (5sec./kb)        100pmol/μL Primer R    1.5*           50ng/μL E. coli ゲノムDNA    5     【 プライマー配列】           Forward Primer :         ATGGTICARATHCCICARAAY Total Volume 50               Reverse Primer :        RTGIGCYTGRTCCCARTTYTC
M : 1kb DNA Ladder 1 : KOD One® PCR Master Mix     2 : KOD One® PCR Master Mix      -Blue- 3 : KOD -Plus- Neo (従来品)		* 縮重プライマーを使用する場合、縮重度が高くなるとプライマー1種類あたりの          モル濃度が少なくなります。縮重度に合わせてプライマー濃度を上げることで          感度を向上させることができます。

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