新型コロナウイルス変異検出キット

SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit / Variant Primer・Probe

TOYOBO

価格表

SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit

Code No. 包装 価格(税別) 保存温度 説明書
仕様書
SDS 法規制
VCK-101 100回用 ¥78,000 -20℃ なし

SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe

品名 Code No. 包装 価格(税別) 保存温度 説明書
仕様書
SDS 法規制
SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe(N501Y)
VPM-501 100回用 ¥20,000 -20℃ なし
SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe(E484K)
VPM-484 100回用 ¥20,000 -20℃ なし
SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe(L452R)
VPM-452 100回用 ¥20,000 -20℃ なし
SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe(E484A)
VPM-484A 100回用 ¥20,000 -20℃ なし

用途

●新型コロナウイルスの変異の検出

※本製品は研究用試薬です

説明

SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kitは、SARS-CoV-2 Variant Primer/ Probeと組み合わせて使用することで、新型コロナウイルスの変異を検出することができます。
本製品では、唾液、咽頭/鼻咽頭ぬぐい液などの試料を前処理液と混合後、熱処理を行い、RT-PCRに供することでRNA抽出精製作業を行うことなく、ウイルスのRNAを検出します。

特長

●別売りのプライマー・プローブと組み合わせることで、新型コロナウイルスの変異の検出が可能


  N501Y:アルファ株、ベータ株、ガンマ株、オミクロン株などで変異が報告されています
  E484K:ベータ株、ガンマ株で変異が報告されています
  L452R:デルタ株で変異が報告されています
  E484A:オミクロン株で変異が報告されています


●RNAの精製不要で簡便
核酸を精製する必要はありません。試料(咽頭/鼻咽頭ぬぐい液、唾液など)と前処理液を混合、熱処理をするだけで、PCRを行うことが可能です。


●約60分で変異の検出が可能
試料から約60分で新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)の変異の検出が可能です。

●キャリーオーバーコンタミネーションによる偽陽性のリスクを低減
酵素液にUracil-DNA Glycosylase(UNG)を含有しており、誤って混入した増幅産物を分解するため、キャリーオーバーコンタミネーションによる偽陽性を防止します。

実施例

104、50、25、0コピーのN501Y変異、E484K変異、L452R変異、E484A変異のある各陽性コントロールおよび野生株の陽性コントロールを鋳型とし、変異の検出を行いました。解析には、CFX96 Touch Deep Wellを用い、閾値を100と設定しました。


①N501Y 変異検出例
増幅試薬:SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe (N501Y) [Code No. VPM-501]
SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit [Code No. VCK-101]
コントロール:Twist Bioscience のControl 2 (MN908947.3) (野生株)
                         Twist Bioscience のControl 15  (B.1.1.7_601443) (N501Y変異株)


②E484K 変異検出例
増幅試薬:SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe (E484K) [Code No. VPM-484]
SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit [Code No. VCK-101]
コントロール:Twist Bioscience のControl 2 (MN908947.3) (野生株)
                         Twist Bioscience のControl 16 (B.1.351) (E484K 変異株)



③L452R 変異検出例
増幅試薬:SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe (L452R) [Code No. VPM-452]
SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit [Code No. VCK-101]
コントロール:Twist Bioscience のControl 2 (MN908947.3) (野生株)
                         Twist Bioscience のControl 18 (B.617.1) (L452R 変異株)



④E484A 変異検出例
増幅試薬:SARS-CoV-2 Variant Primer・Probe (E484A) [Code No. VPM-484A]
SARS-CoV-2 SARS-CoV-2 Detection PCR Core Kit [Code No. VCK-101]
コントロール:Twist Bioscience のControl 2 (MN908947.3) (野生株)
                         Twist Bioscience のControl 48 (B.1.1.529, BA.1) (E484A 変異株)



※閾値については機種、機台により調整が必要です。

製品内容
【VCK-101】  
前処理液 660μL×1本
反応液 1,100μL×3本
酵素液 550μL×1本

【VPM-501, VPM-484, VPM-452, VPM-484A】

プライマー・プローブ液

550μL×1本
基本反応条件
①前処理  
  前処理液 3μL
  試料 8μL
  Total 11μL

5min.程度室温で放置、熱処理 95℃、5min.  


②RT-PCR反応液  
  反応液 30μL
  酵素液 5μL
  プライマー・プローブ液 5μL
  前処理済:試料または
               コントロール
11または10μL
  Total 51または50μL
 

サイクル条件
<Roche> LightCycler®96,  
    LightCycler®480 Instrument II
<ABI>7500Fast*, QuantStudio 5*
<Bio-Rad> CFX96 Touch,
           CFX96 Touch Deep Well
<TaKaRa> DiceIII(Cy5 フィルター有)
         
  逆転写反応 42℃ 5min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  伸長
95℃
60℃
5sec.
30sec.
45 cycles
 (検出)        

 * ROX補正をはずし、Standard Mode で実施してください。


<TaKaRa>CronoSTAR 96
         
  逆転写反応 42℃ 5min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  伸長
95℃
60℃
15sec.
30sec.
45 cycles
 (検出)        


※上記以外のFAM、Cy5チャンネル対応のリアルタイムPCR装置でもご使用になれます。
装置により、最適なサイクル条件が異なりますので、条件を記載していない機器は東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。 

ワンポイントアドバイス

RT-PCR反応終了後は反応液が白濁しておりますが、検査結果には影響しません。

※ 法規制について
毒: 毒物及び劇物取締法[医薬用外毒物]
国: 国民保護法[毒素]
劇: 毒物及び劇物取締法[医薬用外劇物]
組: カルタヘナ法(遺伝子組換え生物等の使用等の規制による
危: 消防法[危険物]
   生物の多様性の確保に関する法律)
P: PRTR法(化学物質排出把握管理促進法)[届け出義務物質]
申: ご購入時に申込書の提出が必要な製品
労: 労働安全衛生法[通知または表示義務物質]
なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品

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