PerfectHyb^® Hybridization Solution

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本品は添加物が不要であり、常温での結晶の析出がなく、粘性も低いため、ハンドリングが容易です。また、ハイブリダイゼーションと洗浄の温度を同一に設定でき、ハイブリダイゼーションオーブンを用いた解析に最適です。
また、RIラベルプローブの解析だけではなく、DIGラベル等のNon-RIの解析にも使用可能です。
 

●高感度

ハイブリダイゼーション促進剤を含有しており強いシグナルが得られるため、低発現遺伝子の検出に有効です。
 

●幅広い用途に最適化

サザン及びノーザンブロット解析に使用できます。Non-RI解析用としても至適化されています。
 

●迅速

通常のハイブリダイゼーションは1～2時間で完了します。
 

●簡便

常温での結晶の析出がなく、粘性も低いため、ハンドリングが容易です。
Salmon sperm DNAなどの添加も不要です。
 

1. PerfectHyb(R)を用いたNorthern Blot例

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HeLa細胞由来のTotal RNA 5μgを使用して、50%ホルムアミドを含むアガロースゲルにて電気泳動を行い、メンブレンに転写を行いました。プローブはTransferrin Receptor遺伝子を鋳型として、ランダムプライミング法にて[³²P]dCTPによるインターナルラベルのプローブを作製し、MagExtractor^TM -PCR & Gel Clean up- [Code No. NPK-601]により精製し、用いました。 PerfectHyb^® 、他社ハイブリダイゼーション溶液及び通常法(Molecular Cloning 7.52参照)を用いた結果を左に示します。結果より、PerfectHyb^® は他社品と比べ感度良く検出することがわかりました。
 

2. PerfectHyb(R)を用いたSouthern Blot例

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Human Cell Lineから抽出したゲノムDNAをHaeⅢで切断したものを1μg泳動し、ナイロンメンブレンに転写しました。 プローブは、多型解析プローブYNH24(D2S44)をDIG標識したものを使用しました。 その結果、PerfectHyb^®は他社品と比べ感度及び特異性が高いことが分かりました。

 

1)A. C. Mistry et al., Biochem. J., 360: 107-115(2001)