様々な用途に用いることのできるスタンダードなPCR酵素です。

スタンダードDNAポリメラーゼ rTaq DNA Polymerase

価格表

Mg別添タイプ

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
TAP-201 250U×1本 ¥9,500 -20℃ データシート 該当無し

Mg含有タイプ

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
TAP-211 250U×1本 ¥9,500 -20℃ データシート 該当無し

用途

●PCR
 

説明

本酵素はThermus aquaticus YT-1よりクローニングされたTaq DNA polymeraseの遺伝子を大腸菌を用いて組換え発現させ調製したものであり、天然のものと同じ性質を示します。
高純度化しているため、特異性に優れています。


 

特長

●2タイプから選択可能
実験の目的に合わせて、反応バッファーをMg別添タイプとMg含有タイプから選択可能です。
 

実施例

ゲノムDNAを用いたPCR例

HumanゲノムDNA(50ng)を鋳型として、Primer 20pmoles、酵素1.25Uの条件を用い、50μlの反応系で増幅を行いました。Mg2+とdNTPsの終濃度は、それぞれ1.5mMと0.2mMとし、アニーリング温度を55℃としました。その結果、180bpから1.3kbまでのターゲットを効率良く増幅することができました。


 

参考文献

1)F. C. Lawyer et al., J. Biol. Chem., 264: 6427-6437(1989)
2)T. Nagahama et al., Stem cells, 19: 425-435(2001)


 


 

製品内容

rTaq DNA Polymerase(5U/μl) 50μl
10×Buffer[TAP-2B(Mg別添タイプ)/TAP-2M(Mg含有タイプ)] 1ml
25mM MgCl2(Mg別添タイプのみ)[TAP-2S] 1ml
2mM dNTPs[NTP-201] 1ml

* 本酵素によるPCRは、dNTPs[NTP-201]をお使いください。他のdNTPsでは、充分な性能を得られない場合があります。


 

形状:
20mM Tris-HCl(pH8.0)
100mM KCl
0.1mM EDTA
1mM DTT
0.5% Nonidet® P-40
0.5% Tween® 20
50% Glycerol

10×Buffer組成:
〈Mg別添タイプ〉[Code No. TAP-2B]
100mM Tris-HCl(pH8.3)
500mM KCl

〈Mg含有タイプ〉[Code No. TAP-2M]
100mM Tris-HCl(pH8.3)
500mM KCl
15mM MgCl2


活性の定義:
75℃において、30分に10nmolesの全ヌクレオチドを酸不溶性画分に取り込む酵素量を1Uとします。

起源:
E.coli 組換体

注意事項


*酵素溶液には、消防法危険物 第4類
 引火性液体 第3石油類 水溶性液体に
 該当するグリセロールが 50%含まれ
 ますが、引火点測定試験で危険物に
 該当しないことを確認しております。
 

基本反応条件

滅菌蒸留水Xμl
10×Buffer 5μl
25mM MgCl2 3μl(1.5mM)
各Primer 5~50pmoles each
2mM dNTPs 5μl(0.2mM)
Taq(5U/μl)0.25~0.5μl(1.25~2.5U)
鋳型 1~50ng(Plasmid)
    10~1000ng(Genomic DNA)
          ~1μl(逆転写反応液)
Total  50μl
 

ワンポイントアドバイス

●ホットスタートPCR
抗Taq DNA polymerase抗体「anti-Taq high」を混合して用いることでホットスタートPCRが可能です。

●PCR産物のクローニング
本酵素によるPCR産物は、TAクローニング法によってクローニングできます。高効率TAクローニングキット「TArget CloneTM」などをご使用いただけます。本酵素は校正活性を示さないため、正確性はあまり良くありません。

●PCR条件の設定について
伸長反応は、ターゲット1kbに対して1min.を標準とします。アニーリング温度は、Tm値から5-10℃低めに設定します。もしバンドが認められない場合には更にアニーリング温度を下げる、もしくはマグネシウム濃度を上げて検討します。エキストラバンドが生じたときにはアニーリング温度を高めに設定する、もしくはマグネシウム濃度を下げることをお薦めします。

 

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(別売りパーツ)

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
rTaq DNA Polymerase(Mg別添)用 Buffer TAP-2B 1ml ¥1,000 -20℃ 該当無し
rTaq DNA Polymerase(Mg含有)用 Buffer TAP-2M 1ml ¥1,000 -20℃ 該当無し
rTaq DNA Polymerase / KOD DNA Polymerase用 25mM MgCl2 TAP-2S 1ml ¥1,000 -20℃ 該当無し
dNTPs Mixture(2mM) NTP-201 1.0ml ¥8,000 -20℃ データシート 該当無し

●高効率TAクローニングキット

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データシート
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TArget Clone TAK-101 10回用 ¥12,000 -20℃ 取扱説明書 該当無し

●ホットスタートPCR用抗体

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anti-Taq high TCP-101 100μl×1本 ¥16,000 -20℃ 取扱説明書 データシート 該当無し
※1 法規制について
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
: 消防法に基づく危険物です。
: 御購入時に申込書の提出が必要な製品です。
: 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」 (カルタヘナ法)に基づく組換え体または昆虫細胞組換え体で生産されたタンパク質です。
該当なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品です。