実施例
KOD FX 実施例10 培養細胞懸濁液からの増幅
KOD FXと他社製品を用いて、細胞懸濁液からの直接増幅を試みました。
【サンプル】DMEM/10%血清培地を用いて培養したJurkat細胞
【ターゲット長】1.3, 3.6, 8.5 kb
【プライマー配列】
Primer
1.3 kb β-globin Target
Primer F : 5’-TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC-3’
Primer R: 5’-CCAGGATTTTTGATGGGACACG-3’
3.6 kb β-globin Target:
Primer F : 5’-GGTGTTCCCTTGATGTAGCACA-3’
Primer R: 5’-ACATGTATTTGCATGGAAAACAACTC-3’
8.5 kb β-globin Target:
Primer F : 5’-TGATAGGCACTGACTCTCTGTCCCTTGGGCTGTTT-3’
Primer R: 5’-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3’
KOD FXを用いた場合には、すべてのサイズにおいて明瞭な増幅が認められました。
培養細胞の遺伝子を解析する際に、KOD FXを用いることで、DNA精製の手間が省けることがわかりました。
