実施例
KOD FX 実施例9 血液(Whole Blood)サンプルからの増幅
KOD FXは、血液(Whole Blood)サンプルからの直接増幅が可能です。
1. 他社製品との比較(写真上)
【サンプル】血液 1~4μL / 50 μL Reaction
【遺伝子名】Human β-globin gene
【ターゲット長】1.3kb
2. 伸長性の確認(写真下)
【サンプル】血液 2μL / 50 μL Reaction
【遺伝子名】Human β-globin gene
【ターゲット長】1.3, 3.6, 8.5 kb
【プライマー配列(共通)】
1.3 kb β-globin Target
Primer F : 5’-TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC-3’
Primer R: 5’-CCAGGATTTTTGATGGGACACG-3’
3.6 kb β-globin Target:
Primer F : 5’-GGTGTTCCCTTGATGTAGCACA-3’
Primer R: 5’-ACATGTATTTGCATGGAAAACAACTC-3’
8.5 kb β-globin Target:
Primer F : 5’-TGATAGGCACTGACTCTCTGTCCCTTGGGCTGTTT-3’
Primer R: 5’-ACATGATTAGCAAAAGGGCCTAGCTTGGACTCAGA-3’
【反応液組成、サイクル】
※他社製品のPCRサイクリング条件は各社で推奨されているサイクルで増幅いたしました。
【結果】
1. KOD FXを用いた場合のみ、血液量に相関して明瞭な増幅が認められました。
2. 8.5Kbまで明瞭な増幅が確認できました。