Hot Start rTth (DNA) Kit
TOYOBO
価格表
用途
●リアルタイムPCR
●PCR
説明
本試薬は、Tth DNA Polymerase を使用した PCR 試薬です。
Tth DNA Polymerase は、汎用酵素である Taq DNA Polymerase と比べ、増幅効率が高く、微量な核酸からの増幅やPCR 阻害物質を含むクルードサンプルからの増幅が可能です。
また Tth DNA Polymerase は、5’→3’Exonuclease 活性を有するため、TaqMan®アッセイなどのプローブアッセイを用いたリアルタイム PCR にも利用することができます。本試薬には、中和抗体が混合されており、特異性の高い Hot start PCR を行うことができます。
特長
● 優れたDNA 増幅効率
Tth DNA Polymerase をベースに反応組成を最適化し、微量の鋳型からでも効率よくPCR を行うことができます。
● クルードサンプルに強い
PCR 阻害物質を含むクルードなサンプル(生体試料、土壌、食品など)からの増幅に優れます。血液などでは、核酸を抽出することなく直接反応液に加えるだけで十分な増幅が可能です。
● dUTP 含有
本試薬の2x Buffer for rTth/ TTx (DNA) 中にはdUTP が含まれています。Uracil-N-Glycosylase(UNG)*を添加することで、キャリーオーバーコンタミネーションによる偽陽性を防止することができます。
* UNG は本製品中には含まれません。
実施例
アルデヒドデヒドロゲナーゼ2(ALDH2)遺伝子のSNP検出
TaqMan®プローブを用いて、血液を鋳型にアルデヒドデヒドロゲナーゼ2(ALDH2)遺伝子のSNP を検出しました。
20 μLの反応液に1 μLの血液を添加し反応に供した結果、Taq DNA Polymeraseベースの試薬では血液の阻害を受け、増幅が確認できませんでした。一方、本試薬においては、遺伝子型に由来するシグナルが確認できました。血液からDNA を精製することなく、SNP を判断でき、大幅に検査時間を短縮することができました。
- 製品内容
2×Buffer for rTth/ TTx (DNA)*
Hot Start rTth DNA Polymerase1.25mL×2本
62.5μL×1本
*緩衝剤、塩類、Mg2+、dATP、dCTP、dGTP、dUTP などが含まれています。
- 基本反応条件
(μL) 滅菌蒸留水 X 2×Buffer for rTth/TTx(DNA) 10 10μM Primer F 0.6 10μM Primer R 0.6 TaqMan® Probe 0.4 Hot Start TTx DNA Polymerase 0.25 Sample Y 
Total Volume 20
Applied Biosystems®機器やアジレント社製機器などでウェル間の蛍光強度および分注誤差補正のためパッシブリファレンスを使用する場合は、別売品である50× ROX reference dye[Code No. ROX-101]をお使いください。→各機種におけるROX添加量をご参照ください。
qPCRサイクル例 95℃ 1min. 95℃ 15sec. 
40～50 cycles 60℃ 30sec.
- ※ 法規制について
- 毒： 毒物及び劇物取締法[医薬用外毒物]
- 国： 国民保護法[毒素]
- 劇： 毒物及び劇物取締法[医薬用外劇物]
- 組： カルタヘナ法(遺伝子組換え生物等の使用等の規制による
- 危： 消防法[危険物]
- 生物の多様性の確保に関する法律）
- Ｐ： PRTR法（化学物質排出把握管理促進法）[届け出義務物質]
- 申： ご購入時に申込書の提出が必要な製品
- 労： 労働安全衛生法[通知または表示義務物質]
- なし： 上記法令や申込書の提出に該当しない製品
