製品別FAQ
【miRNAssay qPCR RT Master Mix】
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Q 使用できる鋳型RNAの濃度はどのくらいでしょうか?
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A
10μLのcDNA合成反応液中に1pg～100ngの範囲のRNAが使用可能です。
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Q 鋳型RNAの希釈には何を使用すればよいですか?
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A
ジエチルピロカーボネート(DEPC)不使用タイプのNuclease-free Waterの使用をお勧めします。
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Q Stem Loop構造を持つRTプライマーはキットに添付されていますか?
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A
本キットには添付されていません。以下の文献を参考に設計いただくか、TaqMan® MicroRNA Assays(Thermo Fisher Scientific社)などをご使用になれます。
(参考文献1)
Martha F. Kramer「STEM-LOOP RT-qPCR for miRNAS」Curr Protoc Mol Biol. 2011 July ; CHAPTER: Unit15.10.
https://doi.org/10.1002/0471142727.mb1510s95(参考文献2)
Zsolt Czimmerer, Julianna Hulvely, Zoltan Simandi, Eva Varallyay, Zoltan Havelda, Erzsebet Szabo, Attila Varga,
Balazs Dezso, Maria Balogh, Attila Horvath, Balint Domokos, Zsolt Torok, Laszlo Nagy, Balint L. Balint
「A Versatile Method to Design Stem-Loop Primer-Based Quantitative PCR Assays for Detecting Small Regulatory RNA Molecules」
PLoS One. 2013;8(1):e55168.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0055168 -
Q Stem Loop構造を持つRTプライマーの濃度の範囲はどのくらいでしょうか?
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A
通常50 nMで良好な結果が得られない場合は、濃度を20nMから100nMを目安にご検討ください。
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Q 通常10μLの逆転写反応のスケールアップは可能でしょうか?
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A
可能です。
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Q 本キットの逆転写反応液は、リアルタイムPCR反応液へどのくらいまで添加可能でしょうか?
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A
リアルタイムPCR反応液の最大で10%程度まで添加可能です。
