実施例

CATAROSEV 実施例3 大腸菌由来細胞外小胞の回収例

【試料】大腸菌E.coli DH5αの培養上清中の微⽣物由来細胞外⼩胞
・培養上清原液 (電気伝導度 19.5mS/cm) を0M or 0.2M NaCl 10mM Tris- HCl を用いて 電気伝導度を① 6.0mS/cm、② 9.3mS/cm、③ 19.3mS/cmに調整

【精製プロトコル】
・膜の平衡化 : 0.10M NaCl 10mM Tris-HCl×5mLを通液
・試料の膜への吸着 : 各試料を通液 　① 通液量13.3mL、② 通液量8.3mL、③ 通液量5.0mL
・洗浄 : 0.1M NaCl 10mM Tris-HCl×10mLを通液
・回収 : 0.3M NaCl 10mM Tris-HCl×2mLを通液、回収

【回収サンプル/NTA測定結果】



【考察】
微生物由来の細胞外小胞は、菌種によって表面電荷が大きく異なることが知られています。
回収量が少ない場合は、吸着時の塩濃度を下げるなどをご検討ください。


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