KOD FX 実施例38
タバコ葉からの直接PCR


サンプル


タバコの葉(2mm角)

遺伝子名・ターゲット

rbcL, rbcmtT 1.3~4.6 kb

プライマー

1.3 kb rbcL
Forward primer: 5’-ATGTCACCACAAACAGAGACTAAAGC-3’
Reverse primer: 5’-AAGCAGCAGCTAGTTCCGGGCTCCA-3’
2.2 kb rbcmtT
Forward primer:  5’-TCCCCTTTGCTGACCTGGTAAGATTC-3’
Reverse primer:  5’-GATAAAAGCCACCTCTCAAGCCCAAG-3’
 4.6 kb rbcmtT
Forward primer: 5’-CGGTAAAGCCAGGAATTGTACCAGAAGG-3’
Reverse primer: 5’-GGAAGATAATGGTGGCCTCAATCAAAGG-3’

【反応液組成】

PCRサイクル条件

94℃, 2 min.

(98℃ 10sec.,   68℃  1min../kb) × 35 cycles

コメント

タバコ葉を直接サンプルとして用いて、4.6 kbまでの増幅を認めることができました。本方法を用いることによって、より簡便に植物からのジェノタイピング等が可能になると思われます。


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