実施例

KOD One 実施例2 クルードサンプルからの増幅

マウステールライセート(アルカリ溶解法、右図)、血液を用いて、マウス Thy-1 遺伝子、ヒト β-globin遺伝子の増幅を行いました。
反応はそれぞれのPCR酵素の推奨条件に従って5 sec./ kbの伸長時間で実施しました。その結果、KOD One^® PCR Master Mix のみ明確なバンドを確認することができました。


【プライマー配列】
マウス Thy-1
Forward Primer: CCACAGAATCCAAGTCGGAACTCTTG
Reverse Primer: GTAGCAGTGGTGGTATTATACATGGTG

ヒト β-globin
Forward Primer: GGTGTTCCCTTGATGTAGCACA
Reverse Primer: ACATGTATTTGCATGGAAAACAACTC
                                      

【反応液組成】				【PCRサイクル】
		(μL)
	滅菌蒸留水	> Y		98℃ 10sec.		30cycles
	KOD One® PCR Master Mix	25		60℃  5sec.
	10pmol/μL Primer F	1.5		68℃  5sec./kb
	10pmol/μL Primer R	1.5
	Template	X		A社高速・高正確PCR Master Mixは、 メーカーの推奨条件に従って実施 しています。
	Total Volume	50

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