検出がより簡便な前処理不要のノロウイルス検出キット

リアルタイムPCR法によるノロウイルス検出キット、前処理不要タイプ ノロウイルス検出キットG1/G2
-高速プローブ検出 Direct-

価格表

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
FIK-293 100回用 ¥90,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し

用途

●ノロウイルス遺伝子の検出

説明

本製品は、糞便検体からノロウイルスの genogroup GI 、genogroup GII 遺伝子をRT-PCR法で検出するキットです。糞便検体懸濁液の前処理が不要なため、反応液に糞便検体懸濁液上清を添加して、RT-PCR反応を実施するだけでノロウイルスを検出することができます。

特長

●前処理が不要、便懸濁液を調製した反応液に添加するのみ
前処理液との混合や熱処理などの前処理が不要となり、簡便・迅速に反応準備が可能です。さらに、1-step RT-PCR は最短43分で完了するため、報告までの時間を短縮することができます。
※反応時間は、リアルタイムPCR装置により異なります。最短43分は、Roche LightCycler® 96 の反応時間です。

 

●反応液調製は2種類の液を混合するだけ
反応液は、2種類の液を混合するだけで調製できます。調製した反応液は、4℃で2日間、または-20℃で1週間安定です。そのためあらかじめ反応液を分注しておくことも可能です。

 

●プライマー・プローブは通知法に記載の配列を使用
GIおよびGII遺伝子の検出には、厚生労働省通知法「ノロウイルスの検出法について」厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安全課(平成15年11月5日付け食安監発第115001号別添) に収載されたプライマー、プローブ配列を使用しております。
 

●試薬調製は室温で可能
前処理、試薬の調製はすべて室温で可能ですので、アイスブロックや氷の準備が不要であり、霜の付着を気にする必要がありません。
 

●安心。UNG処理でキャリーオーバーのリスクを軽減
偽陽性の発生原因として、キャリーオーバー汚染があります。本製品は混入したPCR増幅産物を分解することが可能なUracil-DNA Glycosylase(UNG)を含むため、混入した PCR 増幅産物を分解し偽陽性のリスクを低減できます。
 

●大量調理施設衛生管理マニュアルに記載のノロウイルス検査法に対応
本製品は概ね便1g当たり105オーダーのノロウイルスを検出することが可能です。
大量調理施設衛生管理マニュアル(平成9年3月24日衛食第85号別添(最終改正 : 平成29年6月16日付け生食発0616 第1号))に記載のノロウイルス検査法に対応しております。

実施例

1.陰性糞便の前処理液にスパイクした合成RNAの検出

陰性糞便に1,250コピー、250コピー、50コピー、25コピーの GI、GII 合成RNAを添加し検出を行いました。その結果、25コピー/反応までの検出を確認しました。


 

2.共感染モデルにおけるスパイクした合成RNAのGI/GII 同時検出

GI、GII RNAのいずれかを 1×105 コピー、他方を0から1,250コピーまでスパイクし検出した結果、一方が1×105コピー存在しても他方は25コピーの検出が可能であることを確認しました。


GI GII GIの検出 GIIの検出
105コピー 1,250コピー
250コピー
50コピー
25コピー
0コピー u.d.
 
GI GII GIの検出 GIIの検出
1,250コピー 105コピー
250コピー
50コピー
25コピー
0コピー u.d.


 

 (参考)ノロウイルスの流行株の判定や感染源の特定における弊社キットの活用例 - * -  * -


 (配列解析用サンプル調製)イノシンを含むプライマーを用いた1-step RT-PCRによるノロウイルス遺伝子の増幅

製品内容
反応液A 1,200μL×4本
反応液B  840μL×1本
基本反応条件
反応液組成  
  反応液A 40μL
  反応液B 7μL
  便検体懸濁上清 3μL
  Total 50μL

サイクル条件    
Bio-Rad CFX96 TouchTM Deep Well
  熱処理 90℃  1min.    
  逆転写反応 58℃ 2min.    
         
  変性
  会合・伸長
95℃
56℃
1sec.
10sec.
5cycles
         

  変性
  会合・伸長

95℃
54℃
1sec.
10sec.
5cycles
         

  変性
  会合・伸長

95℃
52℃
1sec.
10sec.
35cycles
 (検出)        

※上記以外のリアルタイムPCR装置でもご使用になれます。
装置により、最適なサイクル条件が異なりますので、詳しくは東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。

増幅曲線データから陽性+、陽性++、陽性+++または、陰性を判定するソフトウェアをご用意しております。製品ご購入の方に無償でご提供いたします。詳しくは東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。

備考

株式会社ビー・エム・エルよりノロウイルスの検出方法(特許第4437525号および第4414648号)に関するライセンスを受けております。

関連商品

●食中毒原因菌・ウイルス遺伝子検出キット

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
ノロウイルス検出キット G1/G2 -ふき取り-
<3 色プローブ検出>
FIW-101 50回用 ¥81,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
ノロウイルス定量キット G1/G2 FIT-101 50回用 ¥63,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット -プローブ検出- FIK-351 480回用 ¥240,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (サルモネラ検出用) FIK-361 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (腸管出血性大腰菌検出用) FIK-362 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (赤痢菌用) FIK-363 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-高速蛍光検出- FIK-311 480回用 ¥240,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
※1 法規制について
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
: 消防法に基づく危険物です。
: 御購入時に申込書の提出が必要な製品です。
: 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」 (カルタヘナ法)に基づく組換え体または昆虫細胞組換え体で生産されたタンパク質です。
該当なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品です。