検便検体から熱処理なしでノロウイルスを検出。反応時間は最短39分。

リアルタイムPCR法によるノロウイルス検出キット、時間短縮タイプ ノロウイルス検出キットG1/G2
-高速プローブ検出 Quick Step-

価格表

Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
FIK-273 100回用 ¥90,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 危

用途

●ノロウイルス遺伝子の検出

説明

本製品は、糞便検体からノロウイルスgenogroup GI, GII遺伝子をRT-PCR法で検出するキットです。サンプルの熱処理が不要なため、作業途中においてチューブの開閉を行う必要がありません。また、逆転写反応からPCRまでを約50 分で行うことができます。

特長

●熱処理工程が不要
熱処理が不要となり、前処理工程の簡便化、時間短縮が可能となりました。キャップの開け閉めがないため、クロスコンタミのリスクを低減できます。


●RT-PCR・プローブのよる検出が最短 39 分で完了
反応組成の最適化により、RT-PCR の高速化を実現しました。検便検体を前処理後、39 分~1時間程度で反応 ・ 検出が完了します。従来品より前処理時間 ・ 反応時間が短くなり、報告までの時間を短縮することができます。
※反応時間は、 リアルタイム PCR 装置により異なります。 最短 39 分は、 Roche LightCycler 96® の反応時間です。


●試薬調製は室温で可能
前処理、試薬の調製はすべて室温で可能ですので、アイスブロックや氷の準備が不要であり、霜の付着を気にする必要がありません。

●安心。UNG 処理で、キャリーオーバーのリスクを低減
偽陽性の発生原因として、キャリーオーバー汚染があります。本製品は混入した PCR 増幅産物を分解することが可能なUracil-DNA Glycosylase(UNG) を含むため、混入した PCR 増幅産物を分解し偽陽性のリスクを低減できます。

●大量調理施設衛生管理マニュアルに記載のノロウイルス検査法に対応
本製品は、概ね便 1g 当たり 105オーダーのノロウイルスを検出することが可能です。
大量調理施設衛生管理マニュアル (平成 9 年 3 月 24 日衛食第 85 号別添 (最終改正 : 平成 29 年 6 月 16 日付け生食発0616 第 1 号)) に記載のノロウイルス検査法に対応しております。

実施例

1.陰性糞便の前処理液にスパイクした合成 RNA の検出

GI または GII RNA を 0 コピーから 6,250 コピーまでスパイクし検出した結果、 50 コピーまですべて検出が可能でした。

       <GI RNA>                                                  <GII RNA>

           *紫色の曲線がGI、オレンジ色がGII、青色はICの増殖を示します。
 

2.共感染モデルにおけるスパイクした合成 RNA の GI/GII 同時検出

GI、GII RNAのいずれかを1x105コピー、他方を50コピーから1x105 コピーまでスパイクし検出した結果、一方が1x105コピー存在しても他方は50コピーの検出が可能であることを確認しました。



 

 (参考)ノロウイルスの流行株の判定や感染源の特定における弊社キットの活用例 - * -  * -


 (配列解析用サンプル調製)イノシンを含むプライマーを用いた1-step RT-PCRによるノロウイルス遺伝子の増幅

参考文献

1) K. Terauchi et al., Jpn. J. Food Microbiol., 35(4) : 193-198 (2018)

製品内容
前処理液 330μL×1本
反応液  1,100μL ×3本
酵素液 550μL×1本
プライマー液(G1/G2) 550μL×1本
プローブ液(G1/G2) 550μL×1本
基本反応条件
前処理  
  前処理液

3μL

  便検体懸濁液 1μL

  Total 4μL

反応液組成  
  反応液 30μL
  酵素液 5μL
  プライマー液(G1/G2) 5μL
  プローブ液(G1/G2) 5μL
  前処理済懸濁液 4μL
  Total 49μL

サイクル条件        
Roche LightCycler 96®
  逆転写反応 42℃ 4min.    
  プレ変性 95℃ 10sec.    
         
  変性
  会合・伸長
98℃
52℃
1sec.
10sec.
2cycles
         

  変性
  会合・伸長

95℃
52℃
1sec.
10sec.
8cycles
         

  変性
  会合・伸長

95℃
52℃
1sec.
10sec.
30cycles
 (検出)        

 ※上記以外のリアルタイムPCR装置でもご使用になれます。
装置により、最適なサイクル条件が異なりますので、詳しくは東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。

増幅曲線データから陽性または、陰性を判定するソフトウェアをご用意しております。製品ご購入の方に無償でご提供いたします。詳しくは東洋紡テクニカルラインまでお問い合わせください。

備考

株式会社ビー・エム・エルよりノロウイルスの検出方法(特許第4437525号および第4414648号)に関するライセンスを受けております。

関連商品

●食中毒原因菌・ウイルス遺伝子検出キット

品名 Code No. 包装 価格 保存温度 取扱説明書
データシート
SDS 法規制※1
ノロウイルス検出キット G1/G2 -ふき取り-
<3 色プローブ検出>
FIW-101 50回用 ¥81,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
ノロウイルス定量キット G1/G2 FIT-101 50回用 ¥63,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット -プローブ検出- FIK-351 480回用 ¥240,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (サルモネラ検出用) FIK-361 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (腸管出血性大腰菌検出用) FIK-362 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-シングル検出- (赤痢菌用) FIK-363 200回用 ¥80,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
腸内細菌遺伝子検出キット-高速蛍光検出- FIK-311 480回用 ¥240,000 -20℃ 取扱説明書 SDS 該当無し
※1 法規制について
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外毒物です。
: 毒物及び劇物取締法に基づく医薬用外劇物です。
: 消防法に基づく危険物です。
: 御購入時に申込書の提出が必要な製品です。
: 「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律」 (カルタヘナ法)に基づく組換え体または昆虫細胞組換え体で生産されたタンパク質です。
該当なし: 上記法令や申込書の提出に該当しない製品です。