ノロウイルス検出キット G1/G2 -プローブ検出-

ノロウイルス検出キットは、急性胃腸炎を引き起こす食中毒の原因として知られているノロウイルスを検便検体からTaqMan^®プローブを用いて1-step RT-PCR法で検出するキットです。
プローブ法の採用により、より短時間(約2時間)で作業を終了でき、G1、G2のタイピングが可能です。

※本製品は、大量調理施設衛生管理マニュアル(平成9年3月24日衛食第85号別添(最終改正:平成29年6月16日付け生食発0616第1号)に記載のノロウイルス検査法に対応しております。

●より迅速、アッセイは2時間以内に終了
TaqMan^®プローブ*の採用により、リアルタイムPCR装置に反応液をセットしてから、1.5時間で結果を確認することが可能です。



*厚生労働省通知法に収載されたプローブ配列を採用しています。
( 「ノロウイルスの検出法について」厚生労働省医薬食品安全部監視安全課( 平成15 年11 月5 日付け食安監発第1105001 号別添) )

●操作が簡便、熱処理後チューブの移し替えが不要
熱処理後は、チューブに反応溶液を添加するのみでRT-PCRが可能です。
チューブの移し替えがないため、手間やチューブを削減することができます。

●G1/G2のタイピングが可能
G1遺伝子をCy5チャネル、G2遺伝子をROXチャネルと異なる波長で検出するため、G1/G2のタイピングが可能です。

●共感染の検出が可能
合成RNAのスパイク実験により、G1、G2 RNA50コピー対1×10⁵コピーまでの同時検出が可能であることを確認しています。

●安心、UNG処理を行うため、キャリーオーバーのリスクを低減
偽陽性の発生原因としてキャリーオーバー汚染があります。本製品は、混入した増幅産物を分解可能なUracil-DNA Glycosylase(UNG)を含むため、混入したPCR増幅産物を分解し、偽陽性のリスクを低減できます。

1.陰性糞便の前処理液にスパイクした合成RNAの検出

G1またはG2 RNAを0コピーから1×10⁵コピーまでスパイクし、ノロウイルス検出キットG1/G2 [Code No. FIK-213]を用いて検出を行いました。その結果、50コピーまですべての検出が可能でした。



 

2. 合成RNAを用いた共感染モデルの検出

ノロウイルスの感染例において、まれにG1・G2両タイプが検出された例が報告されています。そこで本キットにおけるG1・G2共感染モデルを用いて検討しました。G1、G2 RNAのいずれかを1×10⁵コピー、他方を0から1×10⁵コピーまでスパイクし、ノロウイルス検出キットG1/G2-プローブ検出- [Code No. FIK-213]検出した結果、一方が1×10⁵コピー存在しても他方は50コピーの検出が可能であることを確認しました。



*紫色の増幅曲線がG1、オレンジ色の増幅曲線がG2、青色の増幅曲線が内部標準)(IC)の増幅を示します。

 

 (参考)ノロウイルスの流行株の判定や感染源の特定における弊社キットの活用例 - * -  * -

 (配列解析用サンプル調製)イノシンを含むプライマーを用いた1-step RT-PCRによるノロウイルス遺伝子の増幅