高正確性RT-PCRキット
ReverTra-Plus-™
TOYOBO
価格表
用途
●RT-PCR
説明
高効率逆転写酵素ReverTra Ace® と高正確性PCR酵素KOD -Plus-を使用
した、高正確・高効率なRT-PCRキットです。KOD -Plus- の正確性はTaq
DNA polymeraseで増幅した場合の約80倍に相当するため、クローニング
に最適です。
特長
●高効率逆転写酵素:ReverTra Ace®使用
遺伝子工学的な改変により作製した改変型M-MLV RTase 「ReverTra Ace®」を使用しており、14kb以上のcDNAの合成が可能です。
●高正確性PCR酵素:KOD -Plus-使用
高正確性PCR酵素「KOD -Plus-」を用いています。本キットがRT-PCRにて変異クローンを発生する確率は1kbのターゲットをクローニングする場合3%と非常に低く、クローニングに適しています。
●幅広いターゲットの増幅を実現
PCRバッファーの至適化により、増幅の困難なターゲットの増幅が可能となりました。
実施例
1. RT-PCR増幅性能の比較(ターゲット長の比較)
HeLa細胞由来の total RNAを鋳型として、各社高正確性RT-PCRキットを用いて増幅性能を比較しました。
その結果、本キットでは、他社キットに比べ、良好な結果を示すことが分かりました。
2. RT-PCR増幅性能の比較(検出感度の比較)
HeLa細胞由来の total RNA(1μg)に既知量のE.coli由来ClpB RNAを混合し、各社高正確性RT-PCRキットを用いて検出し、感度の比較を行いました。
その結果、ReverTra -Plus-TM の検出感度は他社の高正確性RT-PCRキットと比べて1オーダー以上優れていることが分かりました。
参考文献
1) M. Takagi, et al., Appl. Environ. Microbiol., 63: 4504-4510(1997)
2) H. Hashimoto, et al., J. Biochem.(Tokyo), 125: 983-986(1999)
3) H. Mizuguchi, et al., J. Biochem.(Tokyo), 126: 762-768(1999)
4) H. Hashimoto, et al., J. Mol. Biol., 306: 469-477(2001)
- 製品内容
ReverTra Ace® 100μL×1本
KOD -Plus- 100μL×1本
RNase Inhibitor 100μL×1本
5×RT Buffer(25mM MgCl2含有)
[TRT-1B] 400μL×1本
10×PCR Buffer for ReverTra -Plus-TM * [KOD-3B] 500μL×1本
25mM MgSO4[KOD-2S] 500μL×1本
10mM dNTPs[NTP-301] 300μL×1本
RNase Free H2O 1,200μL×1本
Oligo(dT)20[FSK-201] 500μL×1本
Random Primer[FSK-301]100μL×1本
G3PDH Control Primer Set** 各50μL×1本
Positive Control RNA 50μL×1本
*10×PCR Buffer for ReverTra -Plus-TMはKOD -Plus- Ver.2用Bufferと同一組成です。
**Human、Mouse、Rat、及びSwineに対応。G3PDHはシュードジーンが多いため、サンプルに用いる場合には、サンプルをDNaseⅠ処理することをお勧めします。
- 注意事項
PCRには製品に添付されているdNTPsまたは別売りのdNTPs Mixture (10mM) [NTP-301]をご使用ください。他のdNTPsでは、十分な性能が得られない場合があります。
- ※ 法規制について
- 毒： 毒物及び劇物取締法[医薬用外毒物]
- 国： 国民保護法[毒素]
- 劇： 毒物及び劇物取締法[医薬用外劇物]
- 組： カルタヘナ法(遺伝子組換え生物等の使用等の規制による
- 危： 消防法[危険物]
- 生物の多様性の確保に関する法律）
- Ｐ： PRTR法（化学物質排出把握管理促進法）[届け出義務物質]
- 申： ご購入時に申込書の提出が必要な製品
- 労： 労働安全衛生法[通知または表示義務物質]
- なし： 上記法令や申込書の提出に該当しない製品
