高効率ウイルスRNA抽出キット
MagExtractor™ –Viral RNA-
TOYOBO
価格表
用途
●血清や血漿からのウイルスRNA抽出
説明
磁性シリカビーズを用いて、血清や血漿から高純度のウイルスRNAを抽出するためのキットです。抽出したウイルスRNAはPCR等に直接使用することができます。
本キットは、磁性シリカビーズに、破砕溶液中のウイルスRNAを吸着させて回収する方法を原理としており、従来のAGPC法に必要であったフェノールなどの有害な試薬による除タンパク操作やエタノール沈殿操作、高回転による遠心分離操作が不要であり、簡便にウイルスRNAを抽出することができます。
本キットは、磁性ビーズ分離用スタンドを用いてマニュアルキットとして使用できます。
特長
●血清・血漿から高効率でウイルスRNAを抽出
原理
実施例
血清からのHCV RNAの抽出とRT-PCRによる検出例
-
HCV陽性血清の希釈系列(102〜104copies)100μLをサンプルとして、本キットと他社キットにより、HCV-RNAの抽出を行い、得られたRNAの1/40量を使用してRT-nested PCR法によりHCV−RNAの検出を行いました。その結果、本キットではB社キットと同じく103copies/100μLのHCV陽性血清からのRT-PCRによるHCV-RNA検出が可能でした。(※ターゲットは同じ大きさです。それぞれ同じゲルの途中からサンプルを泳動しております。)
参考文献
1)B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 76:615-619(1979)
2)R. Boom et al., J. Clin. Microbiol., 28: 495-503(1990)
- 製品内容
溶解・吸着液 77mL×2本 洗浄液Ⅰ 154mL×1本 洗浄液Ⅱ 200mL×1本 溶出液 10mL×1本 磁性ビーズ 8mL×1本
※試薬は、使用前に必ず室温に戻してください。析出物が見られる場合には、室温で完全に溶解させてから使用してください。
※キットの他に以下の試薬が必要です。
2-メルカプトエタノール
- 注意事項
溶解・吸着液と洗浄液Ⅰには、高濃度のタンパク質変性剤が含まれていますので、取扱いには十分注意し、手袋を着用するなどの予防措置を講じてください。万一、試薬が皮膚に付着した場合には、十分に水洗を行い、また、目に入った場合には、直ちに水洗した後に医師の手当を受けてください。
- 基本反応条件
本キットは、以下のステップによって高純度のウイルスRNAの抽出を行います。
1) サンプルにカオトロピック剤を含む溶解・吸着液を添加し、サンプル中のウイルス粒子を溶解します。
2) 磁性シリカビーズを添加、混合することにより、サンプル中のウイルスRNAをシリカ表面へ吸着させます。
3) 2種類の洗浄液を使用してビーズを洗浄し、不要なタンパク質、塩などを除去します。
4) 滅菌水又は低塩濃度のバッファーなどを使用して、ビーズからウイルスRNAを溶出し、回収します。
- 備考
MagExtractor™ シリーズの各キットに含まれる磁性ビーズは、それぞれ組成が異なるので、他のキットの磁性ビーズを流用することはできません。
- ワンポイントアドバイス
●B/F(固/液)分離について
本キットをマニュアルで使用する場合、磁性ビーズ分離用スタンド(Magical Trapper®)を用いると簡便である。磁性ビーズ分離用スタンドの代わりに簡易卓上遠心機によってもB/F(固/液)分離を行うことができます。
●サンプルについて
凍結/融解を繰り返したサンプルでは、収率が落ちる場合があります。
また、サンプル中にDNAが存在すると、回収溶液にDNAが混入する場合があります。
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English Page
- ※ 法規制について
- 毒： 毒物及び劇物取締法[医薬用外毒物]
- 国： 国民保護法[毒素]
- 劇： 毒物及び劇物取締法[医薬用外劇物]
- 組： カルタヘナ法(遺伝子組換え生物等の使用等の規制による
- 危： 消防法[危険物]
- 生物の多様性の確保に関する法律）
- Ｐ： PRTR法（化学物質排出把握管理促進法）[届け出義務物質]
- 申： ご購入時に申込書の提出が必要な製品
- 労： 労働安全衛生法[通知または表示義務物質]
- なし： 上記法令や申込書の提出に該当しない製品
